Question

【题目】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图1．

（1）植物细胞融合技术中过程①需要利用_____ 酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体．过程②用化学诱导剂诱导细胞融合，细胞层面可能会得到两两融合的细胞类型有_____种．供体叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体比较所特有的结构是_____，该结构的有无可作为初步筛选杂种细胞的标志．

（2）③④培养过程中在培养基成分上的区别主要是_____的不同．④过程还先后包括下列哪些操作顺序_____．

①诱导形成芽　②取合适外植体　③诱导形成未分化状态的细胞　④诱导形成根

（3）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 通过PCR技术进行扩增，可以得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．图2是用该引物对双亲及再生植株1﹣4 基因组DNA进行扩增的结果．据图判断，再生植株1﹣4中一定是杂种植株的有_____．

（4）若要筛选出具有高抗性的杂种植株．可对以上杂种植株分别进行_____接种实验．

Answer 1

【答案】纤维素酶和果胶酶 3 叶绿体 细胞分裂素和生长素的比例（激素的种类和比例） ①④ 1、2、4 黑腐病菌

【解析】

（1）植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，通常用纤维素酶和果胶酶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。两种细胞两两融合，有同种细胞融合和两种细胞间融合，共有三种类型。叶肉细胞与根细胞比较所特有的结构是叶绿体，是初步筛选杂种细胞的标志。

（2）③④分别是去分化和再分化，在培养基成分上的区别主要是细胞分裂素和生长素的比例的不同。再分化的过程包括把诱导形成芽、诱导形成根，即①④。

(3)花椰菜基因组含有碱基对为300和600的DNA片段,黑芥基因组含有碱基对为1 000、1 300和1 500的片段,再生植株3,只含有长度为300和600的片段,与花椰菜一致,1、2、4既含有花椰菜DNA片段,又含有黑芥DNA片段,为杂种植株。

(6)对杂种植株接种黑腐病菌,若不患黑腐病即为具有高抗性的杂种植株。