(9分)国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进震目前，已

经成功获得经纯化的抗凝血酶III蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图：

(1)根据流程图分析，动物乳腺生物反应器主要利用了           技术(至少写2种)。

(2)要实现①超数排卵，应在崂山奶出羊A发情期的某一阶段用          处理，然后收集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是        。

(3)过程④需将抗凝血酶III基因注入受精卵内，在显微镜下判断是否受精作用的标志是                 。

(4)要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，在⑤之前要提取囊胚期的          细胞，采

用检测     技术对其    和        进行检测。

(5)若要一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D，⑤应采用        技术。

2006年11月，执法人员在对某集贸市场出售的鸭蛋进行检查时，测出一种“红心鸭蛋”(蛋黄红色)含有苏丹红。经调查这是少数不良分子将含有苏丹红的所谓“红药”拌入鸭饲料所致。苏丹红学名苏丹，它并非饲料或食品添加剂，这是一种脂溶性的化学染色剂，可分为苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ号四种，这次检测出的苏丹红主要成分为苏丹Ⅳ。回答下列问题：
(1)人在食用“红心鸭蛋”时，苏丹红被消化道上皮细胞吸收的方式是                                    。
(2)你认为鸭蛋黄被染成红色的原因是                                         。
(3)有人认为苏丹Ⅳ有致癌作用。现有健康幼龄小鼠的肝脏、动物细胞培养液、苏丹Ⅳ粉末、有关酶制剂、培养瓶若干、剪刀、光学显微镜等显微观察设备及细胞培养设备等。现欲通过实验探究苏丹Ⅳ对小鼠有无致癌作用。
①本实验涉及动物细胞工程中的有关技术是　　　　，实验中用到的小鼠肝脏为何选自幼龄小鼠　　　　　　　　。用此技术检测苏丹Ⅳ对小鼠有无致癌作用的观察指标是                                。
②实验步骤：
第一步：将小鼠肝脏剪碎，用　　　　酶处理，使其组织细胞分离，并用细胞培养液制成一定浓度的细胞悬浮液。
第二步：将相同体积的小鼠肝脏悬浮液分别装在两个培养瓶A、B中，                                   
                                         。
第三步：                                         。
③实验结果、结论：
可能的结果a：                                                                                   
                                         。
结论：                                                                        。
b：                                                                        。
结论：                                                                                           。

2006年11月，执法人员在对某集贸市场出售的鸭蛋进行检查时，测出一种“红心鸭蛋”(蛋黄红色)含有苏丹红。经调查这是少数不良分子将含有苏丹红的所谓“红药”拌入鸭饲料所致。苏丹红学名苏丹，它并非饲料或食品添加剂，这是一种脂溶性的化学染色剂，可分为苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ号四种，这次检测出的苏丹红主要成分为苏丹Ⅳ。回答下列问题：

(1)人在食用“红心鸭蛋”时，苏丹红被消化道上皮细胞吸收的方式是                                     。

(2)你认为鸭蛋黄被染成红色的原因是                                          。

(3)有人认为苏丹Ⅳ有致癌作用。现有健康幼龄小鼠的肝脏、动物细胞培养液、苏丹Ⅳ粉末、有关酶制剂、培养瓶若干、剪刀、光学显微镜等显微观察设备及细胞培养设备等。现欲通过实验探究苏丹Ⅳ对小鼠有无致癌作用。

①本实验涉及动物细胞工程中的有关技术是　　　　，实验中用到的小鼠肝脏为何选自幼龄小鼠　　　　　　　　。用此技术检测苏丹Ⅳ对小鼠有无致癌作用的观察指标是                                 。

②实验步骤：

第一步：将小鼠肝脏剪碎，用　　　　酶处理，使其组织细胞分离，并用细胞培养液制成一定浓度的细胞悬浮液。

第二步：将相同体积的小鼠肝脏悬浮液分别装在两个培养瓶A、B中，                                   

                                          。

第三步：                                          。

③实验结果、结论：

可能的结果a：                                                                                    

                                          。

结论：                                                                         。

b：                                                                         。

结论：                                                                                            。

利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年山东省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：

⑴在基因工程中，A表示              ，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点                                                                                     

                                                                                                                                   。

　　⑵在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用             技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有                                   、                                  。

⑶基因工程的四个基本操作步骤是目的基因的获取、                              、将目的基因导入受体细胞和                             。若要获得的转基因山羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ，则所构建的基因表达载体必须包括：某种山羊                 及其启动子、终止子、标记基因、                          和复制原点等。

⑷将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用                           方法，但我国科学家独创了                        获得转基因抗虫棉，在②过程中一般采用               方法，受体细胞一般是                  。

⑸由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么?

检测方法是：从转基因山羊的乳汁中提取              ，用                                             ；

预测结果是：如果出现杂交带，表明                                                                        。

　　⑹要确定目的的基因（抗虫基因）导入棉花细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：                                                           。

(7)将目的基因导入受体细胞，需要构建基因表达载体，目的是_____________       

                                                                                                                                 。（2分）

青枯病是马铃薯生产中一种危害严重的细菌性病害。1996年，我国科学家首次在世界上获得抗青枯病转基因马铃薯株系，为防治这种毁灭性病害开辟了道路。他们根据存在于昆虫体内的抗菌肽的氨基酸序列，人工设计并合成了几个抗菌肽基因，例如ShivaA,CecropinB等基因，并将其导入马铃薯中，转基因马铃薯获得了青枯病抗性的表型。
（1）在克隆基因过程中，通常采用             技术对目的基因进行扩增，下列由一个DNA分子扩增为两个DNA分子过程的叙述中，正确的序号顺序是               。
①引物与单链相应互补序列结合 ②目的基因DNA受热变性后解链为单链　　③DNA聚合酶作用下复制
（2）基因工程的第二步是                。一个完整的重组DNA分子的组成除了目的基因外还必须有          、               以及               等。
（3）通常用           方法检测新育出的植株染色体DNA上是否插入了抗菌肽基因。