题目列表(包括答案和解析)
在重组DNA的模拟操作中,下图甲、乙分别模拟两种DNA片段的碱基序列,已知E·coli限制酶专一识别GAATTC序列,并选G—A之间作为切点进行切割。
……CTATCCATGAATTCGGCATAC……
……GATAGGTACTTAAGCCGTATG……
甲
……TCCTAGAATTCTATGAATTCCATAC……
……AGGATCTTAAGATACTTAAGGTATG……
乙
(1)图甲模拟? 碱基序列,图乙模拟碱基序列? 。
(2)在上图中用箭头标出E·coli限制酶的作用部位。
(3)写出甲、乙经E·coli限制酶切割后形成的黏性末端。
(4)写出经DNA连接酶连接后形成的重组DNA分子的碱基序列。
在重组DNA的模拟操作中,下图甲、乙分别模拟两种DNA片段的碱基序列,已知E·coli限制酶专一识别GAATTC序列,并选G—A之间作为切点进行切割。
……CTATCCATGAATTCGGCATAC……
……GATAGGTACTTAAGCCGTATG……
甲
……TCCTAGAATTCTATGAATTCCATAC……
……AGGATCTTAAGATACTTAAGGTATG……
乙
(1)图甲模拟?碱基序列,图乙模拟碱基序列?。
(2)在上图中用箭头标出E·coli限制酶的作用部位。
(3)写出甲、乙经E·coli限制酶切割后形成的黏性末端。
(4)写出经DNA连接酶连接后形成的重组DNA分子的碱基序列。
为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行讲解,分析片段大小。下表是某小组进行的相关实验。
| 已知第一线性 DNA序列共有 5000bp (bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物 (单位bp) | 第二步水解 | 产物 (单位bp) |
| A酶切割 | 3500 | 将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1500 2000 | |
| 1000 | 1000 | |||
| 500 | 500 | |||
| B酶切割 | 2000 | 将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 | 500 1500 | |
| 3000 | 2000 1000 | |||
| 经A酶和B酶同时切割 | 2000 1500 1000 500 | |||
(1)该实验中体现出限制酶的作用特点是 。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为 个和 个。
(3)根据表中数据,请在下图中用箭头标出相应限制酶的酶切位点。
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(4)已知BamH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH I和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干次循环后
和 序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化 键的形成。
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基因工程是指按人们意愿设计,通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。基因工程操作过程中需要应运许多种生物技术。请回答下列问题:
(1)用PCR技术特异性地拷贝目的基因时加入引物1和引物2,引物为单链DNA片段,是子链合成延伸的基础。两种引物及其与模板链的结合位置如下图所示。第3轮循环的产物中,含有引物A的DNA分子有________个,独立X基因有________个。
(2)形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制酶MumⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是
。下图表示目的基因两端的碱基对序列。请在方框中绘出限制酶EcoRⅠ作用后获得目的基因。
(3)A、B、C、D表示四种质粒,其中箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表标记基因。适于作为目的基因运载体的质粒是________,理由是________。
干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质。科学家利用基因工程技术从人的T淋巴细胞中提取干扰素基因转入羊的DNA中,培育出羊乳腺生物发生器,使羊乳汁中含有人体干扰素。请回答:
(1)科学家将人的干扰素基因与乳腺蛋白基因的调控组件重组在一起,通过________等方法,导入哺乳动物的________细胞中,然后,将该细胞送入母体内,使其生长发育成为转基因(或成熟)动物。
(2)在基因工程中,________是一种最常用的运载体,它广泛地存在于细菌细胞中,在用目的基因与它形成重组DNA过程中,一般要用到连接DNA分子的工具酶是________,该酶作用于上图________处。(填“a”或“b”);构建目的基因表达的载体中除目的基因外还包括________。
(3)在该工程中切割DNA所用的基因“剪刀”是限制酶,限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?________。其正确的末端互补序列为________
(4)如何检测和鉴定人的干扰素基因已被成功导入羊体内?请写出一种方法:
________。
(5)科学家陈炬在干扰素生产方面也作出了突出贡献,他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上,将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法有有________法和花粉管通道法。若由导入目的基因的烟草体细胞培养成植株则需要利用________技术。为了确定烟草具有抗病毒能力是否培育成功,既要用放射性同位素标记的DNA作探针进行分子杂交检测,又要用抗病毒的接种实验方法从________水平进行鉴定植株的抗病特性。
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