［生物――选修３　现代生物科技专题］（15分   每空1分）

下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。 

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因密码子具有___________性，基因序列不同，蛋白质可以相同。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用____________技术。该技术中使用的关键酶是________________________ ；原料是____________________。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是____________，载体上的____________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

构建的基因表达载体中含有_______  _______  ______  ______  ____（从下列选项中选择）。

①目的基因   ②CaMV 35S启动子 ③果实专一性启动子2A12    ④引物    

⑤标记基因    ⑥内含子滞留序列      ⑦终止密码子                ⑧终止子

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测___________________ 。还可以从________水平进行鉴定。

（每空1分，共15分）图1是两种高等生物细胞亚显微结构模式图。图2—4是图1中部分结构的放大，据图回答。（[   ]内填图中标号，      上填适当内容的文字。）

（1）图中的结构1—15中不应该出现的是[   ]           和[   ]           ；可能含有水溶性色素的是[   ]          ；结构15与[   ]               的形成有关。

（2）图2、3、4所示在结构上的主要共同点是                      。只有使用            显微镜才可以看到图4所表示的结构，其生理作用是                               的主要场所，是细胞                   的控制中心。

（3）若图1中有根尖根毛区细胞，正处于营养液中，则在正常情况下，与其吸收无机盐离子有关的细胞器主要是［    ］和［    ］。因为进行此生理活动需要前者提供            ，后者提供             。

（4）用含³H标记的亮氨酸培养液培养图1中的细胞研究抗体的合成和分泌途径，在此过程中测得该细胞中出现³H的含磷脂的细胞结构的面积变化曲线如图5所示，曲线d、e、f所指代的细胞结构依次是                                           （写名称）。

（5）图1所示动物细胞吸水膨胀时，1的厚度变小，说明1具有                  。图1能将分泌物从细胞内排出到细胞外，体现了其具有的功能是                         。

（选修3—现代生物科技专题）（15分，（2）②3分，其余每空2分）。
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。

在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
（1）Klenow酶是一种＿＿＿＿＿酶，合成的双链DNA有＿＿＿＿＿个碱基对。
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G^↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（3分）。
③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有＿＿＿＿＿。
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

[生物—选修3现代生物科技专题] (15分)干扰素常用于治疗病毒感染引起的疾病，现在可以通过基因工程大量获得。请回答相关问题。
（1）已知干扰素的氨基酸序列，则获取目的基因的较简单方法是            ，目的基因还可以从cDNA文库获取，但cDNA文库只含某种生物的部分基因，原因是               。
（2）基因表达载体除含有干扰素基因外，还必须有                、                和                等。
（3）如果受体细胞为受精卵，则此过程还涉及到动物细胞培养技术，动物细胞培养的条件包括            、营养、            、气体环境，提供气体中CO₂的主要作用是  
       。
（4）转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先是检测受体细胞 
       上是否插入目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的头键，检测的方法是            。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应蛋白质，利用的技术是            。

36、（每空2分，共15分）细胞内的各种生物膜在结构上既有明确的分工，又有紧密的联系。结合下面关于溶酶体（一类含多种水解酶、具有单层膜的细胞器）发生过程和“消化”功能的示意图，分析回答下列问题。

（1）b是刚形成的溶酶体，它起源于细胞器a；e是由膜包裹衰老细胞d的小泡，而e的膜来源于细胞器c。由图示可判断：a是        ，c是        ，d是           。

（2）f表示b与e正在融合，这种融合的过程反映了生物膜在结构上具有       特点。

（3）细胞器a、b、c、d膜结构的主要成分是                    等。

（4）细胞器膜、         和          等结构，共同构成细胞的生物膜系统。生物膜的研究具有广泛的应用价值，如可以模拟生物膜的         功能对海水进行淡化处理。