40.  ［生物——选修3:现代生物科技专题］(15分）

某质粒上有SalI、Hi_ndm、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨 苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来 源属于______。

(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐 基因在烟草细胞中不能______，也不能______。

(3)在构建重组质粒时,应选用______和______两种隳对______和______进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

(4)  基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图 表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检 测基因表达载体是否导入了农杆菌。

培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______、______。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______作探针进行分子杂交检测，又要用______方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要 用_______技术，愈伤组织经______进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                         。

铁皮石斛是中国特有的名贵药材，有关铁皮石斛的研究已成为国内外生命科学研究的热点和前沿，近几年来对铁皮石斛培植的研究已取得了很大的进展。根据材料回答下列可题：
（1）铁皮石斛有性生殖繁殖率很低，所以繁殖常用无性繁殖方式进行，如分株、扦插，也可用现代生物技术如__________的方式进行繁殖。通过此方法利用茎尖繁殖的植株几乎无病毒，主要原因是__________。若取同一株铁皮石斛不同部位的细胞进行培养获得的愈伤组织的基因型_________ （相同／不一定相同）。
（2）某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光的各自作用，进行了对照实验，结果如下：

根据以上实验结果，你得出的结论是_________________________。
（3）铁皮石斛也可作为提取DNA的实验材料，与从鸡血细胞中提取DNA相比，实验过程中通常要增加__________步骤。提取DNA的原理是_______________。
（4）用转基因技术可获得抗虫害的铁皮石斛。在该技术中重要的一个环节是基因表达载体的构建，其结构一般包括___________、复制原点、（抗虫）目的基因和标记基因。
（5）药理学研究表明，铁皮石斛多糖具有抗氧化性、降糖、增强免疫和抗肿瘤等作用。又有研究表明，声波刺激可促进铁皮石斛多糖的合成，此种刺激属于________信息。

1.   铁皮石斛是中国特有的名贵药材，有关铁皮石斛的研究已成为国内外生命科学研究的热点和前沿，近几年来对铁皮石斛培植的研究已取得了很大的进展。根据材料回答下列可题：

（1）铁皮石斛有性生殖繁殖率很低，所以繁殖常用无性繁殖方式进行，如分株、扦插，也可用现代生物技术如__________的方式进行繁殖。通过此方法利用茎尖繁殖的植株几乎无病毒，主要原因是__________。若取同一株铁皮石斛不同部位的细胞进行培养获得的愈伤组织的基因型_________ （相同／不一定相同）。

（2）某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光的各自作用，进行了对照实验，结果如下：

培养条件	加蔗糖	不加蔗糖
光	正常生长，分化]	不生长，死亡
暗	只生长，不分化	不生长，死亡

根据以上实验结果，你得出的结论是_________________________。

（3）铁皮石斛也可作为提取DNA的实验材料，与从鸡血细胞中提取DNA相比，实验过程中通常要增加__________步骤。提取DNA的原理是_______________。

（4）用转基因技术可获得抗虫害的铁皮石斛。在该技术中重要的一个环节是基因表达载体的构建，其结构一般包括___________、复制原点、（抗虫）目的基因和标记基因。

（5）药理学研究表明，铁皮石斛多糖具有抗氧化性、降糖、增强免疫和抗肿瘤等作用。又有研究表明，声波刺激可促进铁皮石斛多糖的合成，此种刺激属于________信息。

 

Ⅰ.（7分）甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。

回答下列问题：

（1）为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的             ，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成             组织，然后经过           形成完整的杂种植株。这种培育技术称为                            。

（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指                             。

假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是            。

（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的            等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

Ⅱ.（8分）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为              ，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为                 。

（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为          ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过                   后进行早期胚胎培养获得。

（3）图中重组囊胚通过          技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用           方法保存。

（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的            分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向          后用于疾病的细胞治疗。