下列四条DNA分子中，可能由同一种酶切割产生的一组是（　　）

①                ②               ③                ④

               

A．①②        B．②③        C．③④         D．②④

糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年上升的趋势。下图是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答。

（1）过程②必需的酶是　　　　　 酶，过程③必需的酶是　　　　　 酶。

（2）能否利用人的皮肤细胞来完成①的过程？　　　 ，为什么？　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（3）若A中共有a个碱基对，其中腺嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行5次，至少需要提供鸟嘌呤

　　　　 个。

（4）在利用AB获得C的过程中，必须用　　　　　　　　　 切割A和B，再加入　　　　　　　　　　　 ，才可以形成C。

（5）下列四条DNA分子，彼此间能够粘连起来拼接成新的DNA分子的一组是（　 ）

A.①②　　　B.②③　　　C.③④　　　D.②④

（6）合成的胰岛素含有51个氨基酸，由两条肽链组成，那么决定它的合成的基因至少应含有碱基　　 个。若氨基酸的相对分子量为100，该胰岛素的相对分子量约为　　　　　 ；若核苷酸的平均相对分子量为300，则胰岛素分子对应的mRNA的相对应的分子量为　　　　　　 。

（7）在进行基因工程操作过程中，胰岛素基因必需与运载体——质粒结合后才能进入大肠杆菌体内，并且在细菌内增殖。质粒从分子结构看，它是一种　　　　　　 。它的

　　 增殖方式在遗传学上称为　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（8）不同生物间基因的移植成功，说明生物共用一套　　　　　　　　　　　　　　 。

 

请分析回答下列有关基因工程问题：

Ι 基因工程是按人们预先设计的蓝图，将目的基因通过一定方法导入到另一种生物的细胞中，使之产生符合人类需要的新的遗传性状或创造出新的生物类型的现代技术。

57.基因工程常用的三种工具为限制性内切酶、　　　　　　 、质粒，通常选择质粒作为“目的基因的运输载体”是由于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

58.基因工程一般包括四步：获取目的基因；目的基因与运载体重组；　　　　　　　 ；

　　　　　　　　　 　　。

Ⅱ 在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR如右图示，包括三个基本反应步骤：①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后双链解离；②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得较多的目的基因。

59.温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物时所遵循的原则是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

60.在PCR技术中，引物的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

61.从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为　　　　　　　　 。

62.下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物。则至少需要在　　　 轮循环产物中才能开始出现独立且完整的的X基因。如果经过n次循环，则产物中①所示DNA分子数为　　　　　　 。

63.用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。