7.cDNA:互补DNA 【查看更多】

 

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功能克隆是根据基因的产物来克隆目的基因。例如镰刀型细胞贫血症,是血红蛋白分子中β—珠蛋白的某氨基酸改变造成的,根据这种变异的β—珠蛋白的氨基酸序列设计核苷酸片段,人工合成此片段作为基因探针,筛选病人有核红细胞的cDNA (由mRNA 反转录产生的DNA)文库,得到变异β—珠蛋白基因的cDNA,与正常人的cDNA 进行比较,确认镰刀型细胞贫血症的致病基因,进而克隆该致病基因。

(1)利用功能克隆技术克隆目的基因,首先要分离纯化特定的蛋白质。从红细胞中释放出血红蛋自常用的方法是           ,纯化蛋白质常用的方法是              。

(2)根据变异的β—珠蛋白的氨基酸序列设计核苷酸片段的过程是                。

(3)基因探针是指                。功能克隆过程中,人工合成的基因探针与目的基因的碱基序列常常不能完全互补吻合,最可能原因是                ,为提高基因探针的灵敏度,应选择                (较长、较短)的基因探针用于DNA 分子杂交。

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