为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进一步降解，分析片段大小。下列是某小组进行的相关实验。

⑴该实验设计主要体现了____________________原则。

⑵由实验可知，在这段已知序列DNA分子上，A酶和B酶的识别位点分别为____________________个和____________________个。

⑶根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点。

⑷已知BamH 与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，

若干循环后 ____________________和____________________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化____________________键的形成。

⑸一个基因表达载体的组成除了目的基因外，还必须有_________、___________及标记基因。

【2010·浙江三校联考】肿瘤是危害人类健康的重要疾病。某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是否恶性，切取了其一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列有关问题：

（1）进行体外培养时，肿瘤组织必须先用____________________等处理成单个细胞。

（2）在培养中若要测量肿瘤细胞的数量，可以将待测样品与等量的已知含量的红细胞悬浮液混匀，涂布在载玻片上，经处理后观察。请设计一张用于记录观察数据的记录表，并推导出计算肿瘤细胞数目的公式。

①观察数据记录表：

②肿瘤细胞数的计算公式：____________________

（3）若在肿瘤细胞培养液中加入用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂培养一段时间后，洗去3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被3H标记，而当时处于其它时期的细胞则不带标记。不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的分裂期细胞，计算其中带3H标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数。得到下图（图1～图4中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数）：

①图2中a点开始检测到带3H标记分裂期细胞，则o-a为                                         期，理由是：                                   。

②图2中b点带3H标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a-b段表示                                期，理由是：                                   。

③图3中c点时，带标记的细胞百分数开始下降，则a-c段表示哪些时期：                      。

④此后，带标记的分裂期细胞数逐渐减少，直到消失，到第二次出现带有标记的细胞数时为图表中e点，则一个完整的细胞周期为：                            。

（4）某科研单位研制出一种新型药物X，据说对此类肿瘤有较好的疗效，能起到抑制肿瘤细胞分裂的作用。研究者设计了以下方案加以验证，请将实验步骤补充完整：将肿瘤细胞悬浮液分成等细胞数的A、B两组。A组加入3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，B组应加入                。相同条件下培养一段时间后，洗去培养液，把两组细胞做相应的处理，分别检测两组细胞的放射性强度。如果出现的实验现象为                         ，则说明此药物的疗效好。

Ⅰ、在某生物细胞培养液中加入用³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂培养一段时间后，洗去³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被³H标记，而当时处于其它时期的细胞则不带标记。间期分为  G1期（DNA复制前期），S期（DNA复制期,占间期的大部分时间）， G2期（DNA复制后期），不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的M期 (分裂期)细胞，计算其中带³H标记的细胞占所有细胞的百分数。得到下图（图1～图4中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数）：回答各时期均用字母表示

（1）图2中a点开始检测到带³H标记分裂期细胞，则o-a为___________期
（2）图2中b点带³H标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a-b段表示   期。
（3）图3中c点时，带标记的细胞百分数开始下降，则a-c段表示什么时期：_________
（4）此后，带标记的分裂期细胞数逐渐减少，直到消失，到第二次出现带有标记的细胞数时为图表中e点，则一个完整的细胞周期的时间为：                     。
Ⅱ、操纵元是原核细胞基因表达调控的一种组织形式，它由启动子、结构基因，(编码蛋白基因)、终止子等部分组成。如图表示大肠杆菌细胞中核糖体蛋白(RP)合成及调控过程，图中①②表示相关生理过程，mRNA上的RBS是核糖体结合位点。请回答下列问题：

(1)启动子的基本组成单位是           ，
(2)过程①进行的场所是        ，RPl中有一段氨基酸序列为“一丝氨酸一组氨酸一谷氨酸一”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的反密码子分别为AGA、GUG、CUU，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为          。
(3)图示表明，当细胞中缺乏足够的rRNA分子时，核糖体蛋白RPl能与mRNA分子上的RBS位点结合，从而导致mRNA      ，终止核糖体蛋白的合成。这种调节机制 既保证细胞内rRNA与核糖体在数量上的平衡，又可以减少       。
(4)大豆中的一种成分——染料木黄酮因能抑制rRNA形成而成为抗癌药物的成分，试结合题中信息分析染料木黄酮抗癌的机理                               。

Ⅰ、在某生物细胞培养液中加入用³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂培养一段时间后，洗去³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被³H标记，而当时处于其它时期的细胞则不带标记。间期分为  G1期（DNA复制前期），S期（DNA复制期,占间期的大部分时间）， G2期（DNA复制后期），不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的M期 (分裂期)细胞，计算其中带³H标记的细胞占所有细胞的百分数。得到下图（图1～图4中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数）：回答各时期均用字母表示

（1）图2中a点开始检测到带³H标记分裂期细胞，则o-a为___________期

（2）图2中b点带³H标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a-b段表示   期。

（3）图3中c点时，带标记的细胞百分数开始下降，则a-c段表示什么时期：_________

（4）此后，带标记的分裂期细胞数逐渐减少，直到消失，到第二次出现带有标记的细胞数时为图表中e点，则一个完整的细胞周期的时间为：                     。

Ⅱ、操纵元是原核细胞基因表达调控的一种组织形式，它由启动子、结构基因，(编码蛋白基因)、终止子等部分组成。如图表示大肠杆菌细胞中核糖体蛋白(RP)合成及调控过程，图中①②表示相关生理过程，mRNA上的RBS是核糖体结合位点。请回答下列问题：

(1)启动子的基本组成单位是           ，

(2)过程①进行的场所是        ，RPl中有一段氨基酸序列为“一丝氨酸一组氨酸一谷氨酸一”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的反密码子分别为AGA、GUG、CUU，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为          。

(3)图示表明，当细胞中缺乏足够的rRNA分子时，核糖体蛋白RPl能与mRNA分子上的RBS位点结合，从而导致mRNA      ，终止核糖体蛋白的合成。这种调节机制 既保证细胞内rRNA与核糖体在数量上的平衡，又可以减少       。

(4)大豆中的一种成分——染料木黄酮因能抑制rRNA形成而成为抗癌药物的成分，试结合题中信息分析染料木黄酮抗癌的机理                               。