科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组.并成功地在大肠杆菌中得以表达.但在进行基因工程的操作过程中.需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒.便于重组和筛选.已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATTC-.限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.请据图回答: (1)在过程③一般将受体大肠杆菌用处理.以增大的通透性.使含有目的基因的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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（5分）科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是－G^↓GATTC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－^↓GATC－，请据图回答：

（1）在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理，以增大　　　　　的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。

（2）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是，这些细菌中导入了________________。

【答案】

（1）CaCl₂　细胞壁　　（2）普通质粒或重组质粒　抗氨苄青霉素和四环素抗性　　重组质粒　

【解析】

试题分析：（1）大肠杆菌通常用氯化钙处理，会增大细胞壁的通透性，容易让外源基因导入。

（2）能生长的表明细菌中已经导入了重组质粒或者是普通质粒，空圈的位置说明这些细菌抗氨苄青霉素和四环素抗性，表明这些细菌中导入了重组质粒。

考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。

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科目：高中生物 来源： 题型：

科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，得到的重组质粒导入牛的受精卵，使其发育为转基因牛，再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌，并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。

(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的，图中①过程需要的酶是________。该过程所依据的碱基互补配对原则是________________(用字母和箭头表示)。

(2)图1中的mRNA是从人体的哪些细胞中获取的？

________________________。

(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断，如图3所示：

①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落，而不能在培养基B上生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的________，即目的基因插入了________中。

②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落，而在培养基B上能生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的________，即目的基因插入了________中。

③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落，则使用限制酶a的切点是图2中的________。

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科目：高中生物 来源：2010年江苏省江都中学高二第二学期期末考试生物试题 题型：综合题

（8分）科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：

（1）由上述质粒结构图可知基因工程中的载体至少应具备的条件是
①_________________________________ ,②_________________________________ 。
（2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应选用限制酶_________（填“I”或“II”）切割质粒，再用_____________缝合目的基因和质粒之间的缺口，可获得_____种重组质粒。
（3）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有_____________的培养基上，待平板冷凝后为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。经过一定时间培养后，能够在培养基上生长的，说明已导入了__________________________，反之则没有导入。