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    6．回答下列有关生物工程的问题．
    Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图1（图中数字序号表示的是相关过程）．

                              图1

                                      图2 
    （1）在核移植前应去除卵母细胞的细胞核．
    （2）过程②，重组胚胎培养到一定时期时，可从其内细胞团中分离出的ES细胞的特点是具有全能性，能够分裂和分化形成所有组织和器官．
    （3）过程③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体，具体过程如图2．图中Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同．可以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列（或核苷酸序列或遗传信息）设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，④过程采用的酶是PstI酶和EcoRI酶，⑤过程采用的酶是DNA连接酶．如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成的DNA片段有6种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占$\frac{1}{6}$．
    （4）在ES细胞培养液中加入特定的促进分化的因子可以体外诱导定向形成造血干细胞．
    （5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．

    分析 1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体．
    2、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．
    3、在基因工程中，目的基因和质粒需要用同种限制酶进行切割，形成相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接成重组质粒．
    4、目的基因分子水平上的检测：
    ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
    ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
    ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术

    解答 解：（1）核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核．
    （2）囊胚期的内细胞团细胞处于胚胎干细胞，具有全能性，能够分裂和分化形成所有组织和器官．
    （3）设计引物要遵循碱基互补配对原则，所以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列进行设计．根据图2中先用含有四环素的培养基进行筛选可知，四环素抗性基因没有被破坏，破坏的是氨苄青霉素抗性基因，因此为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，④过程采用的酶是Pst I酶和EcoR I酶，⑤过程采用的酶是DNA连接酶．如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，若Pst I酶的切割位点用1表示，EcoR I酶的切割位点用2表示，HindⅢ酶的切割位点用3表示，则形成的DNA片段1→2，2→1，2→3，3→2，1→3，3→1六种片段，其中只有2→1片段含有完整四环素抗性基因，即含有完整四环素抗性基因的DNA片段占$\frac{1}{6}$．
    （4）在ES细胞培养液中加入特定的促进分化的因子可以体外诱导定向形成造血干细胞．
    （5）基因表达的产物是蛋白质，因此为了检测Rag2基因的表达情况，可以提取小鼠骨髓细胞的蛋白质进行抗原-抗体杂交．
    故答案为：
    （1）卵母细胞
    （2）内细胞团     具有全能性，能够分裂和分化形成所有组织和器官
    （3）脱氧核苷酸序列（或核苷酸序列或遗传信息）    Pst I酶和EcoR I酶     DNA连接酶     6     $\frac{1}{6}$
    （4）特定的促进分化的因子
    （5）蛋白质

    点评 本题以基因治疗的流程图为载体，考查了基因工程、细胞工程以及胚胎工程等方面的知识，难度适中．考生要能够识记细胞核移植的过程；识记囊胚包括内细胞团和滋养层两部分；明确基因工程中质粒和目的基因需要利用同种限制酶进行切割；掌握目的基因检测和鉴定的一般方法等．

    练习册系列答案
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    下列各项中，可能导致尿糖产生的因素有

    ①肾小管病变，葡萄糖的重吸收能力下降 ②一次性大量进食糖类

    ③病毒感染并破坏胰岛B细胞 ④胰岛A细胞分泌旺盛，胰高血糖素含量过高

    A．①②④

    B．①②③

    C．②③④

    D．①②③④

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    17．豌豆的体细胞中有14条染色体，在细胞有丝分裂后期，细胞中的染色体、染色单体、DNA分子数依次为（　　）
    A．28、0、28B．28、28、28C．14、0、14D．14、14、14

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    14．图为有关细胞分裂的概念图，下列说法正确的是（　　）
    A．①过程中无纺锤体和染色体出现，不发生DNA复制
    B．②过程中，染色体与核DNA分子在数目上具有平行关系
    C．②过程有利于维持亲子代细胞遗传物质的稳定性
    D．精原细胞以②或③的方式增殖过程中有2个细胞周期．

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    1．据调查，某地有一男子存在染色体异常核型，表现型正常，但其一条14号和一条21号染色体相互连接形成一条异常染色体，如下图1．减数分裂时异常染色体发生三条染色体会配对在一起，如下图2，配对的三条染色体中，在分离时，任意配对的两条染色体移向一极，另一条染色体随机移向细胞另一极．
    （1）图1所示的异常染色体行为是BC．（多选）
    A．交换
    B．联会
    C．螺旋化
    D．着丝粒的分裂
    （2）下列相关叙述正确的是AC．（多选）
    A．观察异常染色体应选择处于减数第一次分裂中期的细胞
    B．图1所示的变异为染色体数目的畸变
    C．如不考虑其他染色体，理论上该男子产生的精子类型有6种
    D．该男子与正常女子婚配产生正常后代的概率为$\frac{1}{4}$．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    9．用生命系统的结构层次分析，下列结构分别属于哪个层次？
    （1）受精卵  （2）肝脏  （3）血液  （4）某山上所有的生物  （5）某农场所有的水稻  （6）一个池塘（　　）
    A．细胞    器官    组织     群落    种群   生态系统
    B．细胞    组织    器官     种群    群落   生态系统
    C．细胞    器官    组织     种群    群落   生态系统
    D．个体    组织    组织     群落    种群   生态系统

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    15．生物体内的新陈代谢与ATP、酶有密切关系．甲图表示了细胞某些代谢过程与ATP的关系，乙图表示酶在化学变化中的作用．请分析回答：

    （1）甲图中，若生物体为蓝藻，细胞消耗ADP的主要场所是细胞质（基质）．而在玉米体内，叶肉细胞通过生理过程①产生ATP的具体部位是叶绿体类囊体薄膜．
    （2）乙图中，若表示过氧化氢酶作用于一定量的H2O2（温度和pH等条件都保持最适宜）时生成物量与反应时间的关系，在d分钟后曲线变成水平的主要原因是底物消耗完全．
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    12．下列有关神经系统的分级调节与人脑的高级功能的描述，不正确的是（　　）
    ①人脑的高级功能是指大脑皮层具有语言、学习、记忆和思维等功能  
    ②维持身体平衡的中枢在小脑，维持生命的呼吸中枢在下丘脑  
    ③患者若S区受损则看不懂文字，若视觉中枢发生障碍则看不见文字  
    ④婴儿不能有意识地控制排尿与大脑皮层发育不健全有关．
    A．①②④B．②③C．①④D．①③④

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