【题目】发根农杆菌的Ri质粒是一种植物遗传转化系统，其有3个功能区：①T-DNA区是Ri质粒上唯一整合到植物基因组上的DNA片段；②Vir毒性蛋白区是发根农杆菌实现高效侵染所必需的区域；③Ori区即复制起始区与功能代谢区。常用的质粒载体pCAMBIA1301在大肠杆菌和发根农杆菌中都能生存和克隆，并且自身携带潮霉素抗性基因以及可以替换T-DNA的DNA片段，经处理后质粒pCAMBIA1301也可具备T-DNA。部分转化过程如图所示。
请回答下列问题：
（1）限制性核酸内切酶能识别图中LB和RB的酶切位点，并能使1个pCAMBIA1301质粒的_____个磷酸二酯键断开。
（2）应用过程中，将目的片段插入到pCAMBIA1301质粒的_______________中，再将构建好的重组质粒转入发根农杆菌细胞中。要确定重组质粒是否被成功导入发根农杆菌，可在培养发根农杆菌一段时间后，利用pCAMBIA1301上自身携带的_____________进行鉴定，也可利用基因探针通过_________________技术进行检测。
（3）可分别用70%乙醇和_________________溶液浸泡处理植物组织，并使其脱分化形成愈伤组织，再用重组发根农杆菌对其进行侵染，之后进行脱菌培养，然后以适当配比的________________________诱导，最终可获得转基因植株。
（4）图中Ri质粒上的T-DNA片段有缺损，因此无法被转化至植物细胞内，但Ri质粒上的__________仍可对侵染过程起到辅助激活作用。若Ri质粒结构完整，其功能类似于根瘤农杆菌中的_______________。
【答案】4 T-DNA 潮霉素抗性基因 DNA分子杂交 5%次氯酸钠 营养物质和生长调节剂 Vir毒性蛋白区 Ti质粒
【解析】
基因工程的操作步骤：
1.目的基因的获取方法：（1）从基因文库中获取；（2）PCR扩增技术；（3）人工合成法。
2. 基因表达载体的构建：①过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
3.将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（1）农杆菌的特点：在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。农杆菌的Ti质粒上的T－DNA可转移到受体细胞，并且整合到染色体的DNA上。根据这一特点，如果将目的基因转移到Ti质粒的T－DNA上，通过农杆菌的转化作用，可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞染色体的DNA上。
4.目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）限制酶能够识别双链DNA分子某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，因此限制性核酸内切酶能识别图中LB和RB的酶切位点，在pCAMBIA1301质粒上切2个切口，使1个pCAMBIA1301质粒的4个磷酸二酯键断开。
（2）根据题意可知，经处理后质粒pCAMBIA1301也可具备T-DNA，将目的基因插入到T-DNA中，可以在T-DNA的作用下转移到受体细胞内染色体的DNA上，要确定重组质粒是否被成功导入发根农杆菌，可在培养发根农杆菌一段时间后，pCAMBIA1301上自身携带的潮霉素抗性基因属于标记基因，标记基因的作用是可以对重组DNA进行鉴定和选择，也可在分子水平上利用基因探针通过DNA分子杂交技术，根据杂交带的有无进行检测发根农杆菌细胞内的DNA上有无目的基因的存在。
（3）在植物组织培养过程中，对外植体可分别用70%乙醇和5%次氯酸钠溶液浸泡处理，并使其脱分化形成愈伤组织，再用重组发根农杆菌对其进行侵染，之后进行脱菌培养，然后以适当配比的营养物质和生长调节剂（生长素类和细胞分裂素类）诱导，最终可获得转基因植株。
（4）根据题意可知，图中Ri质粒上有3个功能区：①T-DNA区是Ri质粒上唯一整合到植物基因组上的DNA片段；②Vir毒性蛋白区是发根农杆菌实现高效侵染所必需的区域；③Ori区即复制起始区与功能代谢区。如果Ri质粒上的T-DNA片段有缺损，因此无法被转化至植物细胞内，但Ri质粒上的Vir毒性蛋白区是发根农杆菌实现高效侵染所必需的区域，仍可对侵染过程起到辅助激活作用。若Ri质粒结构完整，其功能类似于根瘤农杆菌中的Ti质粒。
教材全解字词句篇系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】常规区稻田生态系统碳元素转移示意图如下，箭头和字母分别表示碳元素传递方向和转移量。下列分析不正确的是
A. 调査丁中的小动物类群丰富度常用取样器取样法
B. 水稻生长期，该生态系统碳元素转移量为a＞（b＋c＋e）
C. 图中乙、丁两生物成分在碳循环过程中起着关键作用
D. e中包括未利用的能量，能被土壤微生物通过呼吸作用利用
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】以下是果蝇复眼细胞中产生眼色素B和眼色素D的反应：
野生型果蝇有色素B和色素D，眼睛为红褐色，缺乏色素B为褐色眼，缺乏色素D为鲜红眼，两种色素都无为白色眼。回答下列遗传学问题：
（1）—只白色眼果蝇与野生型果蝇交配，F1体内可具有上述中的_____酶。
（2）若有关基因均在常染色体上，两者独立遗传，一只褐色眼果蝇与一只鲜红眼果蝇交配，F1的眼色最多_____种表型。
（3）利用野生型和褐色眼两种类型的果蝇通过一次杂交实验以确定控制酶R的基因是否为伴X染色体遗传。设计思路:选用_____果蝇进行杂交，观察F1的表现型。
结果若 F1 表现型为_________或_____，说明该基因为伴X染色体遗传。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】赤霉素能刺激幼嫩禾本科植株的节间伸长。将赤霉素3（GA3）滴加于水稻胚芽鞘与第1叶之间，在一定的浓度范围内，已知第2叶叶鞘的伸长与赤霉素浓度的关系如图，因此可以通过测定第2叶叶鞘伸长来进行样品赤霉素含量的生物测定。下列关于该实验叙述中不合理的是（ ）
A.温度是该实验的无关变量之一，应设置成相同且适宜
B.通过图示可判断赤霉素的最适浓度为1000mg/L
C.GA3可能通过促进细胞伸长来促进叶鞘的伸长
D.通过测定第2叶叶鞘伸长判定赤霉素含量，应进行多组重复实验
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【题目】下图表示人类免疫缺陷病毒（HIV）侵入人体并进入宿主细胞后的一系列代谢活动，下列叙述中正确的是（ ）
A.RNA和蛋白质均可通过核膜，但DNA不能
B.艾滋病患者的唾液中不含有HIV，因此我们与艾滋病患者共同进餐、接吻并不会感染HIV
C.HIV会降低人类的特异性免疫能力和非特异性免疫能力
D.HIV可在辅助性T细胞中增殖，其增殖速率与T细胞增殖速率相同
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【题目】SIRT1基因被称为长寿基因，SIRT1蛋白对于延缓内皮细胞衰老，改善因衰老而引起的内皮细胞功能障碍方面具有重要作用。科学家研究白藜芦醇对人内皮细胞衰老凋亡、 SIRT1基因的影响的部分实验结果如下图。其中P1~P35是指体外培养的人内皮细胞的传代次数。下列说法正确的是（ ）
A.人内皮细胞传代培养时，需使用胰蛋白酶处理贴壁生长的内皮细胞
B.随传代次数增加，人内皮细胞内自由基减少，SIRT1表达水平降低
C.对照组应使用等量清水处理人内皮细胞，温度等与实验组保持一致
D.适当浓度的白藜芦醇可以降低体外培养的内皮细胞的凋亡率
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【题目】Ca2+内流会促进突触小泡和突触前膜融合，从而释放神经递质。图表示兴奋在神经—肌肉接头处的传递过程，其中ACh是兴奋性神经递质——乙酰胆碱。下列叙述错误的是
A.ACh受体可能位于神经元树突或胞体膜上
B.若组织液中Ca2+浓度下降，可能会影响兴奋在神经-肌肉接头处的传递
C.ACh发挥作用后，会在突触间隙不断积累
D.ACh与ACh受体结合后，肌细胞可能会发生收缩
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】对下列示意图所表示的生物学意义的描述，准确的是
A．甲图中生物自交后产生基因型为Aadd个体的概率为1/6
B.若只研究细胞中每对同源染色体上的一对基因，则乙图细胞分裂完成后，可能同时产生2种、3种或4种不同基因型的配子
C.丙图所示家系中男性患者明显多于女性患者，该病最有可能是伴X隐性遗传病
D．丁图表示某果蝇染色体组成，该果蝇只能产生AXW、aXW两种基因型的配子
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】将大豆种子置于水分、空气、温度、阳光等条件适宜的环境中培养，定期测定萌发种子或幼苗的重量变化，结果如图所示。回答下列问题：
（1）若以葡萄糖为呼吸底物，第六天测得种子O2吸收量和CO2释放量之比为1∶1，则大豆细胞内无氧呼吸的强度为_________。若H218O参与大豆种子的有氧呼吸，则此过程中18O的转移途径是______，该实验方法是_______。
（2）若第10天大豆种子均萌发成幼苗，则大豆种子幼苗的光合速率_____（“大于”“小于”“等于”）呼吸速率。10天后大豆幼苗重量增加的主要原因是____________。
（3）第11天大豆幼苗叶绿体产生的O2的移动方向是_______。
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