［生物——选修3：现代生物科技专题］
为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进一步降解，分析片段大小。下列是某小组进行的相关实验。
| 已知一线性DNA序列共有5 000bp（bp为碱基对） | 第一步水解 | 产物（单位：bp） | 第二步水解 | 产物（单位：bp） |
| A酶切割 | 3 100 | 第一步水解产物分离后，分别用B酶切割 | 1 900 200 | |
| 1 400 | 800 600 | |||
|
| 1 00 | |||
| 500 | 500 | |||
| B酶切割 | 2 500 | 将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割 | 1 900 600 | |
| 1 300 | 800 500 | |||
| 1 200 | 1 000 200 | |||
| 经A酶和B酶同时切割 | 1 900 1 000 800 600 500 200 |
⑴该实验设计主要体现了____________________原则。
⑵由实验可知，在这段已知序列DNA分子上，A酶和B酶的识别位点分别为____________________个和____________________个。
⑶根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位
点。
⑷已知BamH与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后
和____________________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化____________________键的形成。
⑸一个基因表达载体的组成除了目的基因外，还必须有____________________、____________________及标记基因。
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（现代生物科技）用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：
第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。
第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。
第三步：将插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步：将第三步处理后的胚胎于细胞，转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示：
（1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是______________。neoR基因不仅能使靶基因失活，还是______________；“靶基因失活”的含义是______________。
（2）从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有______________、______________、______________等。
（3）科学家可以通过‘“基因敲除”技术来治疗疾病，上题中获得的基因敲除小鼠，能否直接用来研究基因功能
并说明原因______________，____________________________。
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20世纪50年代，卡尔文及其同事因在光合作用方面的研究成果，获得了1961年的诺贝尔化学奖。卡尔文将小球藻装在一个密闭容器中，通过一个通气管向容器中通入CO2，通气管上有一个开关，可控制CO2的供应，容器周围有光源，通过控制电源开关可控制光照的有无。
（1）他向密闭容器
中通入14CO2，当反应进行到5s时，14C出现在一种五碳化合物（C5）和一种六碳糖（C6）中，将反应时间缩短到0．5s时，14C出现在一种三碳化合物（C3）中，这说明CO2中C的转移路径是_____________________。上述实验中卡尔文是通过控制来探究CO2中碳原子转移路径的.
（2）卡尔文通过改变实验条件探究光合作用过程中固定CO2的化合物，他改变的实验条件是__________________；这时他发现C5的含量快速升高，由此得出固定CO2的物质是C5。
（3）他通过停止_______________，探究光反应和碳反应的联系,他得到的实验结果为下图中的________________。这是因为在没有_____________时，光反应产生的ATP和NADPH减少了。
（4）上述实验中卡尔文将不同反应条件下的小球藻放入70度的热酒精中,从而使___________失活，细胞中的化合物就保持在热处理之前的反应状态。利用不同化合物在层析液中的溶解度不同，在滤纸上分离出各种化合物。卡尔文在光合作用研究中采用了和______________等技术方法。
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［生物——选修3：生物技术实践］
我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领
先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
(1)过程①必需用到的酶是_______。重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有启动子、_______和_______才能构成一个完整的基因表达载体。
(2)将重组质粒导人ES细胞最常用的方法是_______。检测绿色荧光蛋白基因是否已整合到猪胎儿ES细胞的染色体DNA上所用的方法是_______技术。
(3)为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射_______的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到_______期即可通过显微操作将其细胞核去除。
(4)如果想同时得到多头绿色荧光蛋白转基因克隆猪,可通过胚胎分割技术得以实现。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将______________均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
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近期统计数据显示，癌症已经成为我国城乡居民的首要死因。请根据提供的材料回答问题：
⑴体外分别培养某癌细胞和正常体细胞时，如果正常细胞的一个基因突变，能否像癌细胞一样无限增殖？____________________。在体内，癌细胞可能侵袭周围正常组织，说明癌细胞具有____________________的特性。
⑵细胞癌变后，膜表面会出现一些不同于正常细胞的蛋白质，这些蛋白质会成为____________________，引起机体的免疫应答，在应答中能直接使癌细胞裂解的免疫细胞是____________________。
⑶端粒酶是与染色体末端结构相关的一种细胞组分。表中数据显示细胞癌变可能与端粒酶的活性有关，请完成下面的探究实验：
| 细胞类型 | 增殖代数 | 端粒酶活性 |
| 正常体细胞 | 50~60 | 无 |
| 癌细胞 | 无限 | 有 |
实验目的：探究端粒酶与细胞癌变的关系。
实验材料：癌细胞、端粒酶抑制剂、细胞培养液等。
实验步骤：
①______________________________________________________________________。
②______________________________________________________________________。
③______________________________________________________________________。
结果预测及分析：________________________________________________________。
⑷请根据上述内容，提出一种治疗癌症的新思路：______________________________。
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科目：高中生物 来源： 题型：
右图为神经元细胞动作电位的示意图，下列有关分析正确的是
A．a阶段膜内K+浓度低于膜外
B．b阶段的电位变化是Na+主动转运所致
C．c阶段膜内Na+浓度低于膜外
D．d阶段的电位变化是K+内流所致
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科目：高中生物 来源： 题型：
下列有关细胞核功能的最本质的叙述是
A.细胞核是细胞最中心的部分
B.在细胞有丝分裂过程中，核先分裂，然后细胞质分裂
C.细胞核与生命的连续性有密切关系
D.细胞核是遗传物质贮存和复制的场所
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科目：高中生物 来源： 题型：
一只雌鼠的一条染色体上某基因发生了突变，使野生型性状变为突变型性状。该雌鼠与野生型雄鼠杂交，F1的雌、雄中均既有野生型，又有突变型。若要通过一次杂交实验鉴别突变基因在X染色体上还是在常染色体上，选择杂交的F1个体最好是
A．野生型（雌）×突变型（雄）
B．野生型（雄）×突变型（雌）
C．野生型（雌）×野生型（雄）
D．突变型（雌）×突变型（雄）
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磷酸二酯 ⑸启动子 终止子 
