【生物——选修1：生物技术与实践】

自生固氮菌是一类能独立固定氮气的细菌，其中有些好氧的种类能产生PHB（一种可以被生物降解的塑料）。现欲获得高产PHB的自生固氮菌菌种，操作流程如下：采集土样→富培养→分离、纯化培养→初步筛选产PHB的自生固氮菌→筛选高产PHB固氮菌→保存备用。 回答下列问题： 

（1）富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加_________。培养时要将装有培养液的锥形瓶旋转在摇床上，其目的是_________________。 

（2）进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板。此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，其中添加了一定量的_______________。倒平板时，要待高压灭菌后的培养基____________，再在______________附近操作。平板冷凝后，需置于恒温箱中1-2天后再用于接种，目的是______________。 

（3）分离纯化培养后，得到8种形态特征有所不同的单菌落。经染色鉴定，其中3种能产生PHB，那么如何进一步筛选出高产PHB的菌种呢？请说出你的实验思路。

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【生物——选修3：现代生物科技专题】

转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：

（1）质粒的化学本质是______________。

（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________；将目的基因导入受体细胞的方法是______________。

（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是______________，一个质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为___________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：______________________。

（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异？______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________基因作为标记基因。

下列有关DNA重组技术的基本工具的相关叙述，不正确的是

A．DNA重组技术的基本工具有三种：限制酶、DNA连接酶和载体

B．载体需要具有多个限制酶切点，以便于目的基因的鉴定和选择

C．限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的

D．DNA连接酶根据其来源分为两类：E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶

下列关于基因工程的叙述，正确的是(　　)

A. DNA连接酶和RNA聚合酶催化生成的化学键相同

B. 通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制酶处理运载体DNA

C. 为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体

D. 受体细菌若能表达质粒载体上抗性基因，即表明重组质粒成功导入

科学家将含人的α抗胰蛋白酶基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，该受精卵发育成的羊能分泌含α抗胰蛋白酶的奶。这一过程涉及(　　)

①DNA按照碱基互补配对原则自我复制　

②DNA以其中一条链为模板合成RNA

③RNA以自身为模板自我复制　

④按照RNA密码子的排列顺序合成多肽链

A. ①②④ B. ③④ C. ①②③ D. ①②

目前科学家把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入到棉花细胞中，在棉花细胞中抗虫基因经过修饰后得以表达。下列叙述的哪一项不是这一先进技术的理论依据？ （ ）

A．所有生物共用一套遗传密码子

B. 基因能控制蛋白质的合成

C．苏云金芽孢杆菌的抗虫基因与棉花细胞的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成

D．苏云金芽孢杆菌与棉花可共用相同的mRNA和tRNA

基因工程技术引起的生物变异属于（ ）

A．染色体变异

B．基因突变

C．基因重组

D．不可遗传的变异

建立基因文库是获取目的基因的方法之一，下列关于基因文库的说法不正确的是(　　)

A. 理论上基因组文库包含了某种生物的全部基因

B. cDNA文库的建立过程需要使用逆转录酶、RNA聚合酶和DNA连接酶

C. 可以通过检测性状的方法，从基因文库中筛选目的基因

D. 利用同种生物不同组织细胞建立的cDNA文库所包含的基因是不同的

下列技术没有应用DNA分子杂交的是

A．用基因探针检测遗传病 B．检测目的基因是否导入受体细胞

C．从基因文库中找到所需要的基因 D．淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交

科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人类主要蛋白，以下有关该基因工程的叙述，错误的是(　　)

A. 采用逆转录的方法得到的目的基因不含有内含子

B. 基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的

C. 马铃薯的叶肉细胞不可以作为受体细胞

D. 转基因植物的培育利用了细胞的全能性