[生物—选修1生物技术实践] (15分)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验（实验过程符合无菌操作要求）：
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。
请分析上述实验过程并回答下列问题：
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、          、灭菌、     
    ；培养基中牛肉膏的作用主要是为微生物生长提供                            等营养物质；培养基灭菌常用的方法是                         。
（2）如何证明所用培养基已经彻底灭菌？
                                                                                      。
（3）本实验样品接种时最好采用            方法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的            。
（4）请指出本实验设计中的一个明显的错误，并加以改正。
                                                                  。
（5）微生物并非都是对人休有害的，例如：醋酸菌可用业            ；            常用于生产酸奶。
（6）食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用            培养基对种菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现
            色。

回答生物技术在实践应用中的相关问题：

(1)某同学利用柑橘制作果酒，考虑到柑橘的糖含量不足，在制作过程中加入一定量的糖，加糖的主要目的是____________。为保证发酵过程的安全，发酵阶段需要适时拧松瓶盖，但不能完全打开，其主要目的是____________，实际操作中发现随着发酵时间的推移拧松瓶盖间隔时间延长，其原因是___________________________。

(2)某研究性学习小组的同学用适宜浓度的海藻酸钠溶液将活化的酵母细胞固定化后发酵无菌麦芽汁用来制酒，发酵条件符合操作要求。10天后检查发酵液发现麦芽汁几乎无酒味，发酵失败最可能的原因是__________________________________________。

(3)目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的，为节约成本可将酶或细胞固定在一定空间内，称为固定化酶或固定化细胞。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，该种固定法为____________，而细胞多采用____________法进行固定。

(4)在血红蛋白的提取和分离实验中，从红细胞中释放出血红蛋白常用的方法是____________，纯化蛋白质常用的方法是________。

[生物—选修1生物技术实践] (15分)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验（实验过程符合无菌操作要求）：

       ①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；

       ②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；

       ③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；

       ④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。

       请分析上述实验过程并回答下列问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、           、灭菌、     

     ；培养基中牛肉膏的作用主要是为微生物生长提供                             等营养物质；培养基灭菌常用的方法是                          。

（2）如何证明所用培养基已经彻底灭菌？

                                                                                          。

（3）本实验样品接种时最好采用             方法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的             。

（4）请指出本实验设计中的一个明显的错误，并加以改正。

                                                                   。

（5）微生物并非都是对人休有害的，例如：醋酸菌可用业             ；             常用于生产酸奶。

（6）食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用             培养基对种菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现

             色。

 生物选考题（15分）

A．[生物—选修1生物技术实践]

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了____和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和______。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌，这种培养基被称为____。

B．[生物—选修3现代生物科技专题]

现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。

（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_______注入B品种牛的

_________卵母细胞，经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_______，将该胚胎移入代孕母牛的_______中，通过培育可达到目的。

（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量______，为解决这一问题，可以用______激素处理B品种母牛。

（1）克隆牛的产生说明_____具有全能性。克隆牛的性状主要表现____品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自______个亲本，细胞质来自______性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成______（相同，不同）。

［生物——选修1生物技术实践］

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和___________________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是___________________和___________________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___________________中培养，培养的温度设定在37 ℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___________________作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。