40．【生物—选修3：现代生物科技专题】（15分）

       使用DNA重组技术，把天然或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗称为基因工程疫苗。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面A蛋白为主要抗原，其基因工程疫苗生产流程如图30。请回答：

       （1）过程①表示             。

（2）可能利用               技术扩增获得A基因。使用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列来合成           。还需要有耐热的         酶。扩增时DNA解链的温度应控制在        ℃。而互补链延伸时的温度应控制在           ℃。

（3）过程③构建A基因重组载体时，除了A基因外，还必须有      、     和      基因等。这一过程需要使用            和               这两种工具酶。

（4）过程④中选用大肠杆菌作为受体细胞，最常见的转化方法是：用              处理，得到          细胞，再将经过处理的细胞与溶有A基因重组表达载体的缓冲溶液混合，并控制在一定的温度使之完成转化。

（5）可用             技术检测受体细胞菌的DNA上是否插入了A基因，要检测A基因是否成功表达还需检测受体细菌                   。

【生物—生物技术实践】（本题共15分）

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：
（1）（每空2分）提取目的基因
①若已获取PG的mRNA，可通过                获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有        结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                               。
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有          的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                      。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                  现象来鉴别细胞壁是否再生。
（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                        互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄       ，则可确定转基因番茄成功。
（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用     方法使子代保持转基因的优良性状。（2分）

【生物—生物技术实践】（本题共15分）

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

（1）（每空2分）提取目的基因

  ①若已获取PG的mRNA，可通过                 获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有         结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                                。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有           的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                       。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                   现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                         互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄        ，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用      方法使子代保持转基因的优良性状。（2分）

【生物—生物技术实践】（本题共15分）

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

（1）（每空2分）提取目的基因

  ①若已获取PG的mRNA，可通过                 获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有         结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                                。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有           的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                       。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                   现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                         互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄        ，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用      方法使子代保持转基因的优良性状。

（22分）
生长素是植物体的激素，可调节植物多项生命活动，结合生长素的有关知识完成下列问题：
（1）生长素的化学本质是       ,植物茎、根、芽对生长素的敏感程度依次是                   ．对离体植物组织培养过程中，培养基中除了需要添加蔗糖、矿质元素、维生素等物质之外，还必须添加的植物激素是生长素和       ,圆褐固氮菌也可以分泌生长素，其作用为               ,生长素是圆褐固氮菌的     代谢产物，若要观察圆褐固氮菌在培养基上形成的菌落，则其培养基与植物组织培养基的共同物理特征是                ．
（2）下列植物在开花期间由于某种原因影响了授粉，其中可以通过人工涂抹生长素加以补救从而减少损失的是                ．