目前，临床上癌症治疗的方法一般是先通过手术切除肿瘤，为杀死体内残留的癌细胞，在手术后进行化疗。有同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。由此推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，可作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。

实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，细胞计数板，试管，吸管等。

（1）请为一学生设计的实验内容补充完整，不正确之处请修改。

    实验操作如下：

取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液；从小鼠肝部切取肿瘤组织并将其剪碎，利用某种酶处理，使细胞分散开，置于培养皿中培养。

取洁净的试管5支，加入等量培养液，编号1、2、3、4、5， 在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入                      。分别从5支试管取样，在显微镜下观察计数，记录数据。

实验组别	1	2	3	4	5
细胞数目（个/mL）	350	363	342	335	336

从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，在冰箱中培养一段时间。

从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于细胞计数板内，在显微镜下观察计数，记录数据。

（2）请你纠正上面这位同学操作上的错误：

①                                                                           ；

②                                                                           。（3）上述细胞培养液中必需包含细胞生长的营养物质，如：            、           

  和            等。

（4）该学生根据修改后的正确方法进行实验，得到的结果如下：

实验组别	1	2	3	4	5
二氯二乙胺浓度(mg/mL)	0.1	0.2	0.3	0.4	0
细胞数目（个/mL）	320	275	186	96	560

① 在该实验中，遵循了实验设计的            原则和            原则。

② 根据实验结果，你能得出的结论是：

第一，                                                                        ；

第二，                                                                        。

中科院上海生理与生态研究所为“神舟”四号上一批特殊的“新人”——烟草细胞举办了特殊的“婚礼”。将两个“新人”放入融合室中，当充满液体的融合室中加入直流电场，两个原本相互游离的细胞一下子就贴到了一起，开始“窃窃私语”。 紧接着，在瞬间高压脉冲的作用下，细胞膜被击出了小孔，透过这微小的空间，两股细胞质展开了“心灵的沟通”。渐渐地，细胞核也扭捏着“亲热”起来，20 min后，两细胞已是你中有我，我中有你，一个新的生命就这样诞生了。

地面实验结果显示：用于融合的两个“新人”，一号开的是粉花，二号开的是黄花。 融合后的细胞再生植株开的是黄花，但性状却和一号相同(称一号性状，另一个称二号性状)。

(1)由于细胞的密度不同，因此在地面上细胞配对融合非常困难。从理论上讲，在太空中细胞融合更容易，原因是_________________________________________________。

(2)在“细胞婚礼”举行前，必须对“新人”进行特殊处理，方法是______________。在显微镜下观察，“新人”的细胞膜融合在一起，细胞呈圆球状，这是因为__________________

(3)粉花和黄花、一号性状和二号性状属于________，一号性状属于__________。

(4)从染色体组成看，再生植株属于________体。

 

(6分)下图是动物细胞工程过程中相关的技术操作过程，请据图回答下列问题：

(1) 在操作一中，为了使细胞彼此分离，通常是先用剪刀剪碎组织，再用消化法将细胞分开，消化法用的消化酶是胰蛋白质酶，或胶原酶。研究表明胶原蛋白酶和胰蛋白酶在消化时的机制有差异，下表为两种酶活性的比较表。

项目	胰蛋白酶	胶原酶
消化特性	适用于消化软组织	适用于消化纤维多的组织
用量	0.01%～0.5%	0.1～0.3 mg/ml
消化时间	0.5～2小时	1～12小时
pH	8～9	6.5～7.0
作用强度	强烈	缓和
细胞影响	时间过长时有影响	时间长时无大影响
动物血清	有抑制作用	无抑制作用
Ca2＋和Mg2＋	有抑制作用	无抑制作用

　据表中信息可知胰蛋白质酶作用时间需限制在0.5～2小时，原因是____________________________________，为了控制胰蛋白酶的消化作用时间，常用消化临界时向溶液中直接加入________即可使酶灭活而终止消化。操作一的原理是__________________。
(2) 动物细胞培养液配制好后，通常还要先抽取少许放入培养瓶中，置于37℃、CO₂培养箱中24小时后观察，这样做的目的是__________________________。
(3) 在动物细胞培养过程中通常要对细胞进行计数，计数的细胞数应为活细胞数。某同学在细胞培养的一次测定中，首先振荡摇匀培养液并立即吸细胞悬液少数向一试管中滴入细胞悬液9滴，再滴入台盼蓝(活细胞染液)1滴，混匀。再从试管中取混合液向计数板边缘轻轻滴1～2滴已染色的细胞悬液，使之充满计数板和盖玻片之间间隙，经测定计数室每小格中活细胞数平均为3个，则原每毫升培养液中含有的活细胞数应为________个。
(4) 科研人员研究发现某一种抗原刺激机体后，在鼠体内可发现有多种效应B细胞都可产生针对于该特定抗原的抗体，这些抗体混合在一起即为多克隆抗体。试从抗原结构的角度分析产生该现象的原因是____________________________________。

2．(2012·上海单科)如图表示细胞内葡萄糖分解的反应式。下列关于该过程的说法正确的是(　　)

C₆H₁₂O₆(葡萄糖) 2CH₃COCOOH(丙酮酸)＋4［H］＋能量

A．只发生在细胞有氧时

B．只发生在细胞缺氧时

C．只发生在线粒体内

D．只发生在细胞质基质内

(12分)目前临床上癌症治疗的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗，某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。

实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计数板，试管，吸管等。

（1）其中某位同学实验操作如下，请将实验内容补充完整。

①取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用胰蛋白酶处理，使其分散开来，置于培养皿中培养。

②取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5， 并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入                               。

③从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，在冰箱中培养一段时间。

④从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于血球计数板内，在显微镜下计数，记录数据。

（2）请你纠正上面这位同学操作上的错误：

①                                                                            ；

②                                                                            。

（3）另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如下：

实验组别	1	2	3	4	5
二氯二乙胺浓度(mg/mL)	0.1	0.2	0.3	0.4	0
细胞数目（个/mL）	320	275	186	96	560

①在该实验中，遵循了实验设计的                  原则和                     原则。

②根据实验结果,你能得出的结论是                                                 

                                                                      。