大肠杆菌是基因工程常用的受体菌。它既可生活在人和动物肠道内，又可随粪便排出污染环境，因而常用作饮水和食物（或药物）的卫生学标准（国家规定，每升饮用水中大肠杆菌数不应超过3个）。请回答下列与大肠杆菌有关的问题：
（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；从生存环境分析推测，它的新陈代谢类型应该是________。
（2）某研究性学习小组对本校自来水进行了检测。一同学用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有________ mL无菌水的试管中，得到10¹倍稀释的样品；依次稀释，得到10²、10³倍稀释的样品；把每种稀释度的样品分别接种到3个平板培养基上培养，最后统计菌落数。若3种稀释度的平均菌落数分别为402、30、2，应以_______倍稀释的样品来计算水样中的菌体数；若接种量均为0.1 mL，则该水样中大肠杆菌超标_______万倍。
（3）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

人工构建的大肠杆菌质粒pBR322是基因工程中应用最广泛的载体（见图1）。除标注外，图中其他英文缩写表示该质粒上不同的限制性核酸内切酶的切割位点。请分析回答：

（1）此质粒的化学本质是　　　　　 ，它可以作为多种目的基因的（运）载体，原因是　　　　　 。amp^r和tet^r在基因工程中的主要作用是　　　　　　 。

（2）人胰岛素由两条肽链共有51个氨基酸组成，如图2所示。

①通过基因工程培育能合成人胰岛素的工程菌时，可先依据　　　　　　 推出

　　　　　 序列，再推出　　　　　 序列，然后用化学方法人工合成A链和B链基因的片段。将此基因片段分别与　　　　　　 重组后，再导入大肠杆菌内。

② 在大肠杆菌内合成的单独的A、B两条多肽链没有生物活性，是因为细菌中缺少　　　　　 ，不能　　　　　　 。若要直接获得有活性的转基因人胰岛素，可以选择　　　　　　 作为受体细胞。

用基因工程技术使转基因大肠杆菌产生具有活性的人胰岛素，在获取目的基因时，不能直接取自人染色体，否则，产物将是没有活性的肽链，因为

1. A.
   尚不获得相应核酸内切酶截取目的基因
2. B.
   胰岛素基因过大，难以与运载体发生重组
3. C.
   染色体上的基因片段难以准确切下
4. D.
   大肠杆菌没有对该基因产物进行再加工的机制