mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA，通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图所示。

⑴．该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

⑵．M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割，并简述理由：_________________________________________________

⑶．有人认为mtDNA能成为研究人类起源与进化的一个有力工具，请简述理由：_________________________________________________________________________ 。

下图为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。

⑷．现用该基因作为目的基因，若采用直接从供体细胞中分离，具体方法是：_____________。这个方法虽操作方便，但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此，目前往往采用逆转录的人工合成的方法，其基本步骤是：__________________________。

⑸．已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是               。

mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA，通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图所示。

凝胶电泳结果：（1kb=1000对碱基）（+表示该片段的存在以及含量）

下列说法中错误的是

A．该mtDNA的长度为16kb

B．在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点如图所示

C．M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在DNA连接酶的作用下相互连接，连接后的序列可以用M酶、N酶进行切割

D．mtDNA能成为研究人类起源与进化的一个有力工具

mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA，通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图所示。
凝胶电泳结果：（1kb=1000对碱基）（+表示该片段的存在以及含量）

分子量（kb）	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0	7.0	9.0	10.0
酶M	+				+				+
酶N							+	+
酶M+酶N	+	+	+	+		+

 
下列说法中错误的是

1. A.
   该mtDNA的长度为16kb
2. B.
   在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点如图所示
3. C.
   M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在DNA连接酶的作用下相互连接，连接后的序列可以用M酶、N酶进行切割
4. D.
   mtDNA能成为研究人类起源与进化的一个有力工具

（10分）mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA（限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示），然后通过凝胶电泳分离DNA片段（通电状态下，不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离），分析后得到下表。

（1）该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

（2）M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割，请简述理由：________________________________________。

（3）图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因，可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便，但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此，目前往往采用逆转录的人工合成的方法，其基本步骤是：__________________。

图2

（4）已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G 和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以克隆出大量DNA分子。其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)。PCR技术可在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请回答：

(1)图中A过程表示______________________________________________，在活细胞内该过程可由__________酶作用来完成，两过程均是破坏了DNA分子双链间的__________键。

(2)某样品DNA中共含有3000个碱基对，碱基数量满足(A＋T)∶(G＋C)＝1∶2，现在要得到1000个拷贝(即与样本相同的DNA)，至少要向试管中加入___________________个腺嘌呤脱氧核苷酸。

(3)由于子代的染色体一半来自父方，一半来自母方，因此可以利用STR?PCR技术进行亲子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA中的相关STR(短串联重复序列)，并进行PCR扩增，取其中一样本用限制性内切酶切割成特定的DNA小片段，放进凝胶内，进行电泳使DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找有关的STR。相同的STR会聚集在一起，然后利用特别的染料，在X光下便会显示黑色条带。每个人的条带一半与其母亲的条带吻合，另一半与其父亲的条带吻合。

①限制性内切酶能将DNA样品切割成特定的小片段，这主要体现了酶的________。

A．专一性　　　 B．高效性　　 C．多样性　　　 D．作用条件温和

②双胞胎或多胞胎的“基因身份证明”是否一定完全相同？________________，原因是____________________________________________________________________________。

③下图为某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA指纹图谱示意图，请推测该小孩的父亲是__________________。