下图表示基因工程中基因表达载体的构建过程，据图分析下列问题：

　　（1）从图中可看出，切割质粒和目的基因的限制酶是                      。

　　（2）插入的目的基因只是结构基因部分，其表达还需要调控序列，因而用作载体的质粒插入部位前须有                    ，后须有                              。

　　（3）在图中右边的方框内画出甲、乙拼接后形成的重组质粒。

下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出杀虫晶体蛋白基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫植物的图解。请分析回答：

(1)写出b过程的表达式__________________________。

(2)人工合成目的基因的方法有：

①____________________________________________________；

②_____________________________________________________。

(3)将目的基因和载体(质粒)结合的工具酶有_________________________________。

(4)科学家计划从哺乳动物的乳汁中提取某种抗体，应将控制抗体合成的基因导入该种动物的　　　　中，导入基因成功表达的标志是　　　　　　　　　　　　　。

(5)培育出抗虫棉是否就能一劳永逸地解决棉花害虫的问题了吗？是从一个角度说明上述问题：_____________________________________________________________。

如下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出杀虫晶体蛋白基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫植物的图解。请分析回答：

(1)写出b过程的表达式：_________________________________________________。

(2)人工合成目的基因的方法有：①__________________________________；

②________________________________________________________________________。

(3)将目的基因和载体(质粒)结合的工具酶有：_______酶和__________酶。

(4)科学家计划从哺乳动物的乳汁中提取某种抗体，应将控制抗体合成的基因导入该种动物的____________中，导入基因成功表达的标志是________________。

下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素（抗生素）抗性基因，tct^R为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的      酶；二是将目的基因与运载体拼接的       酶；三是作为运载体的质粒。

（2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“          ”、“         ”、“         ”三种，其中有效的（所需要的）基因表达载体是         ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

（3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（基因表达载体）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（基因表达载体）是          。

（4）有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的       。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。是因为这种微生物很容易侵染到                

中，从而把它的Ti质粒上的              转移到受体细胞染色体的DNA上。

（5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是        ；作用于b位置的酶是

                  。