（10分）mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA（限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示），然后通过凝胶电泳分离DNA片段（通电状态下，不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离），分析后得到下表。

凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基） （数字表示该片段的存在以及数量）
分子量（kb）	酶M	酶N	酶M+酶N
1.0	1		1
2.0			1
3.0			1
4.0			1
5.0	1
6.0			1
7.0		1
9.0		1
10.0	1

（1）该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

（2）M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割，请简述理由：________________________________________。

（3）图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因，可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便，但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此，目前往往采用逆转录的人工合成的方法，其基本步骤是：__________________。

图2

（4）已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G 和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

 

样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以克隆出大量DNA分子。其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)。PCR技术可在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请回答：

(1)图中A过程表示______________________________________________，在活细胞内该过程可由__________酶作用来完成，两过程均是破坏了DNA分子双链间的__________键。

(2)某样品DNA中共含有3000个碱基对，碱基数量满足(A＋T)∶(G＋C)＝1∶2，现在要得到1000个拷贝(即与样本相同的DNA)，至少要向试管中加入___________________个腺嘌呤脱氧核苷酸。

(3)由于子代的染色体一半来自父方，一半来自母方，因此可以利用STR?PCR技术进行亲子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA中的相关STR(短串联重复序列)，并进行PCR扩增，取其中一样本用限制性内切酶切割成特定的DNA小片段，放进凝胶内，进行电泳使DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找有关的STR。相同的STR会聚集在一起，然后利用特别的染料，在X光下便会显示黑色条带。每个人的条带一半与其母亲的条带吻合，另一半与其父亲的条带吻合。

①限制性内切酶能将DNA样品切割成特定的小片段，这主要体现了酶的________。

A．专一性　　　 B．高效性　　 C．多样性　　　 D．作用条件温和

②双胞胎或多胞胎的“基因身份证明”是否一定完全相同？________________，原因是____________________________________________________________________________。

③下图为某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA指纹图谱示意图，请推测该小孩的父亲是__________________。

 

(I)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答

(1) 检测尿糖可以使用的试剂是                 。该图提取目的基因的方法
为           法，B的化学本质是           ，从B到C需要的酶有            。D细胞一般选用大肠杆菌等微生物，为使过程⑧更易进行，可用            处理D的细胞。
(2)用某人的胰岛素基因制成的单链DNA探针，检测下列物质，能形成杂交分子的是
①该人胰岛A细胞中的DNA（经处理成单链） ②该人胰岛B细胞的mRNA
③该人胰岛A细胞的mRNA       ④该人肝细胞中的DNA（经处理成单链）

A．①②③④

B．①②③

C．①②④

D．②

(3)下图是分别用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

（4）若甲细胞表示胰岛A细胞，则乙细胞最可能是       细胞。在人体血糖偏低的情况下，乙细胞内会加快的代谢活动是                  。

（II）牛的乳汁中还含有免疫球蛋白，初生牛犊能够通过初乳从母体获得这种免疫.所谓初乳,即母牛分娩后5-7天内的产生的乳,与常乳比较其特点主要是:免疫球蛋白比常乳高20-25倍.试回答如下问题：
（1）免疫球蛋白在免疫学中又被称为________,极少数人服用初乳后出现过敏反应,初乳与吸附在某些细胞表面的抗体结合后，这些细胞释放      ，导致过敏现象发生。
（2）牛是二倍体生物，体细胞中有30对染色体，其中有一对是性染色体，若要对牛的基因组进行测序，应至少测定    个染色体DNA的碱基对的排列顺序。
（3）牛乳的乳脂率属于细胞质遗传还是细胞核遗传，通常用          实验方法来鉴别。

(I)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答

(1) 检测尿糖可以使用的试剂是                  。该图提取目的基因的方法

为            法，B的化学本质是            ，从B到C需要的酶有            。D细胞一般选用大肠杆菌等微生物，为使过程⑧更易进行，可用            处理D的细胞。

(2)用某人的胰岛素基因制成的单链DNA探针，检测下列物质，能形成杂交分子的是

  ①该人胰岛A细胞中的DNA（经处理成单链）  ②该人胰岛B细胞的mRNA

  ③该人胰岛A细胞的mRNA        ④该人肝细胞中的DNA（经处理成单链）

A．①②③④   B．①②③   C．①②④     D．②

(3)下图是分别用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

（4）若甲细胞表示胰岛A细胞，则乙细胞最可能是        细胞。在人体血糖偏低的情况下，乙细胞内会加快的代谢活动是                   。

（II）牛的乳汁中还含有免疫球蛋白，初生牛犊能够通过初乳从母体获得这种免疫.所谓初乳,即母牛分娩后5-7天内的产生的乳,与常乳比较其特点主要是:免疫球蛋白比常乳高20-25倍.试回答如下问题：

（1）免疫球蛋白在免疫学中又被称为________,极少数人服用初乳后出现过敏反应,初乳与吸附在某些细胞表面的抗体结合后，这些细胞释放       ，导致过敏现象发生。

（2）牛是二倍体生物，体细胞中有30对染色体，其中有一对是性染色体，若要对牛的基因组进行测序，应至少测定     个染色体DNA的碱基对的排列顺序。

（3）牛乳的乳脂率属于细胞质遗传还是细胞核遗传，通常用           实验方法来鉴别。