测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术.常用的测定方法是凝胶色谱法.请回答下列问题: (1)凝胶色谱法的原理是 . (2)在装填凝胶柱时不得有气泡的原因是 . (3)某人欲使用凝胶色谱法比较A.B两种蛋白质的分子质量大小.请你选择需要的材料.帮助其设计实验步骤.并预测实验结果.得出相关结论. 实验步骤: 实验结果及结论: (4)若由凝胶过滤法测得某一由2条肽链构成的蛋白质的相对分子质量为m.且已知氨基酸的平均相对分子质量为n.则该蛋白质是由 个氨基酸经脱水缩合而成的. 答案:(1)根据相对分子质量的大小分离蛋白质 (2)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序.减低分离效果 (3)实验步骤:将含有A.B两种蛋白质的混合液加入装满凝胶的玻璃管上端.用缓冲液进行洗脱.检测它们洗脱的先后顺序 实验结果及结论:若A先于B洗脱出来.则A的相对分子质量大于B,若B先于A洗脱出来.则B的相对分子质量大于A 2.红细胞含有大量血红蛋白.红细胞的机能主要是由血红蛋白完成.我们可以选用猪.牛.羊等动物的血液进行实验.来提取和分离血红蛋白.请回答下列有关问题: (1)实验前取新鲜的血液.要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠.取血回来.马上进行离心.收集血红蛋白溶液. ①其中加入柠檬酸钠的目的是 . ②此过程即是样品处理.它应包括红细胞洗涤. .分离血红蛋白溶液. ③洗涤红细胞的目的是 . (2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析.这就是样品的粗分离. ①透析的目的是 . ②透析的原理是 . (3)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化.最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉进行纯度鉴定.其中通过凝胶色谱法将样品纯化的目的是 . 答案:,②血红蛋白的释放,③去除杂蛋白 (2)去除相对分子质量较小的杂质,透析袋能使小分子自由进出.而大分子则保留在袋内通过凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质 3.某同学以菜花为实验材料.进行“DNA的粗提取与鉴定 实验.步骤如下: 步骤一:称取30g菜花.去梗取花.切碎. 步骤二:将碎菜花放入研钵中.倒入10mL研磨液.充分研磨10min. 步骤三:在漏斗中垫上滤纸.将菜花研磨液过滤到烧杯中.在冰箱中放置几分钟.取上清液. 步骤四:将一倍体积的上清液倒入两倍体积的某溶液中.并用玻璃棒缓缓.轻轻地搅拌溶液.将絮状物缠绕在玻璃棒上. 请回答下列问题: (1)请指出并改正该同学实验操作中的错误: . (2)步骤二的目的是使菜花细胞破碎.释放DNA.加入研磨液的主要成分有 和 等.(3)如要使步骤三所得上清液中杂质减少.可进行 操作后再置于冰箱. (4)步骤四中所用两倍体积的某溶液为 .需“缓缓.轻轻地 搅拌溶液的原因是 . (5)简要说明鉴定步骤四所得絮状物是DNA的基本实验设计思路: . 答案:(1)滤纸应改为纱布洗涤剂 NaCl (3)离心 (4)体积分数为95%的冷酒精 防止DNA断裂 (5)将絮状物溶于0.015mol/L的NaCl溶液中.加入二苯胺试剂.沸水浴加热.观察颜色变化.同时用相应浓度的NaCl做对照实验. 4.提取DNA等生物大分子的基本思路是:利用一些物理和化学方法把具有不同理化性质的生物大分子分离.如DNA溶解度和DNA对酶.高温.洗涤剂的耐受性等.根据要求完成实验: 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术。常用的测定方法是凝胶色谱法。请回答下列问题:

(1)凝胶色谱法的原理是                         

(2)在装填凝胶柱时不得有气泡的原因是                  

(3)某人欲使用凝胶色谱法比较A、B两种蛋白质的分子质量大小,请你选择需要的材料,帮助其设计实验步骤,并预测实验结果,得出相关结论。

实验步骤:                                 

                                                                             

                                      

实验结果及结论:                               

                                     

 

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某研究所通过研究不同时间段大鼠坐骨神经缺损,探究神经损伤后的大鼠腓肠肌变化规律。实验过程如下,请据实验内容完成填空并回答有关问题。

Ⅰ 实验动物与分组。选用动物实验室的健康雄性大鼠54只,体重210克左右,按手术后取材时间不同,随机分成9组。

Ⅱ 实验模型的建立。实验用鼠麻醉,无菌条件下暴露双侧坐骨神经,实验侧切除坐骨神经10mm,检查无出血后缝合伤口;对照侧的处理是只暴露坐骨神经不做手术切断即缝合切口。分别于手术后1、2、3、4、5、6、9、12个月时,麻醉动物,完整切取双侧腓肠肌称取湿重后测定肌总蛋白含量。

Ⅲ 数据统计及分析。

表1 大鼠腓肠肌中肌总蛋白含量

 

对照组

1个月

2个月

3个月

4个月

6个月

9个月

12个月

腓肠肌中肌总蛋白含量( mg/mL)

101.67±2.31

97.23±1.93

92.6±3.21

78.33±1.23

71.16±4.16

56.53±7.43

40.21±6.34

31.49±1.83

表2 大鼠腓肠肌细胞中泛素含量变化

 

对照组

1个月

2个月

3个月

4个月

5个月

6个月

9个月

12个月

阳性反应

浅黄色

浅黄色

浅黄色

棕黄色

深棕色

深棕色

深棕色

棕黄色

浅黄色

注:阳性反应呈黄色表明有泛素存在,颜色深浅与含量呈正相关性。

根据上述内容,回答:

(1)在坐骨神经缺损的早期的1~2个月,肌总蛋白含量与对照组相比        ,总蛋白量开始明显下降的是   个月组,1~12个月数据综合分析得出的结论是:

                            

(2)在下面的坐标中,绘出各实验组随时间变化腓肠肌细胞中肌总蛋白减少量的柱状图

(3)泛素是一种存在于大多数真核细胞中的小分子蛋白,它的主要功能是与需要分解掉的蛋白质结合,使其被水解。研究发现,对照组大鼠腓肠肌细胞中也存在有泛素,原因是         

(4)坐骨神经缺损的腓肠肌组织中,泛素的含量 

(填高或低)于对照组,随着神经缺损时间的延长,泛素表达呈     的趋势。神经缺损早期泛素表达     

(5)该实验表明,坐骨神经缺损的大鼠腓肠肌组织细胞中,肌总蛋白含量与泛素含量呈     性关系,是造成腓肠肌因失去神经支配逐渐退化萎缩的直接原因之一。

 

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Ⅰ.为了研究在大豆种子萌发和生长过程中糖类和蛋白质的相互关系,某研究小组在25℃、黑暗、无菌、湿润的条件下萌发种子,然后测定在不同时间种子和幼苗中相关物质的含量,结果如图所示:

(1)在观察时间内,图中可溶性糖含量的变化是         ,萌发前营养物质主要储存在大豆种子的        中,此结构最初由       发育而来。
(2)上图表明:糖类和蛋白质之间的关系是       。糖类在         过程中产生一些中间产物,可以通过        作用生成相对应的    
(3)如果在同样条件下继续培养,预测上图曲线的最终变化趋势是       ,其原因是                         。(3分)
Ⅱ.在上述定量测定之前,进行了蛋白质含量变化的预测实验,请填充实验原理;判断实验步骤中划线部分是否正确,并更正错误之处;写出实验结果。
(1)实验原理:蛋白质          ,其颜色深浅与蛋白质含量成正比。
(2)实验步骤:
①将三份等量大豆种子分别萌发1、5、9天后取出,各加入适量蒸馏水,研碎、提取,定容后离心得到蛋白质制备液;
②取3支试管,编号1、2、3,分别加入等量的萌发1、5、9天的蛋白质制备液;
③在上述试管中各加入等量的a.双缩腺试剂A和B(按比例配制)的混合液,振荡均匀后,b.在沸水浴中加热观察颜色变化。
a:                                                                     
b:                                                                     
(3)实验结果:                              。(2分)

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Ⅰ.为了研究在大豆种子萌发和生长过程中糖类和蛋白质的相互关系,某研究小组在25℃、黑暗、无菌、湿润的条件下萌发种子,然后测定在不同时间种子和幼苗中相关物质的含量,结果如图所示:

(1)在观察时间内,图中可溶性糖含量的变化是          ,萌发前营养物质主要储存在大豆种子的         中,此结构最初由        发育而来。

(2)上图表明:糖类和蛋白质之间的关系是       。糖类在          过程中产生一些中间产物,可以通过        作用生成相对应的    

(3)如果在同样条件下继续培养,预测上图曲线的最终变化趋势是       ,其原因是                         。(3分)

Ⅱ.在上述定量测定之前,进行了蛋白质含量变化的预测实验,请填充实验原理;判断实验步骤中划线部分是否正确,并更正错误之处;写出实验结果。

(1)实验原理:蛋白质          ,其颜色深浅与蛋白质含量成正比。

(2)实验步骤:

①将三份等量大豆种子分别萌发1、5、9天后取出,各加入适量蒸馏水,研碎、提取,定容后离心得到蛋白质制备液;

②取3支试管,编号1、2、3,分别加入等量的萌发1、5、9天的蛋白质制备液;

③在上述试管中各加入等量的a.双缩腺试剂A和B(按比例配制)的混合液,振荡均匀后,b.在沸水浴中加热观察颜色变化。

a:                                                                      

b:                                                                     

(3)实验结果:                                。(2分)

 

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为了研究在大豆种子萌发和生长过程中糖类和蛋白质的相互关系,某研究小组在25℃、黑暗、无菌、湿润的条件下萌发种子,然后测定在不同时间种子和幼苗中相关物质的含量,结果如图所示
Ⅰ.(1)在观察时间内,图中可溶性糖含量的变化是____________,萌发前营养物质主要储存在大豆种子的________________中,此结构最初由__________发育而来.
(2)上图表明:糖类和蛋白质之间的关系是_________,糖类在____________过程中产生一些中间产物,可以通过___________作用生成相对应的________。
(3)如果在同样条件下继续培养,预测上图曲线的最终变化趋势是_________,其原因是___________。
Ⅱ.在上述定量测定之前,进行了蛋白质含量变化的预测实验,请填充实验原理;判断实验步骤中划线部分是否正确,并更正错误之处;写出实验结果.
(1)实验原理:蛋白质___________其颜色深浅与蛋白质含量成正比
(2)实验步骤:
①.将三份等量大豆种子分别萌发1、5、9天后取出,各加入适量蒸馏水,研碎、提取、定容后离心得到蛋白质制备液;
②.取3支试管,编号1、2、3,分别加入等量的萌发1、5、9天的蛋白质制备液;
③.在上述试管中各加入等量的双缩脲试剂A和B(按比例配制)的混合液,振荡均匀后,a 在沸水浴中加热观察颜色变化a:______________________;b:______________________。
(3)实验结果:___________________________________。

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