在基因工程过程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是（    ）

A．将基因水解成脱氧核苷酸            

B．切断目的基因碱基对之间的氢键

C．识别并切割特定的DNA碱基序列      

D．将目的基因与运载体结合

18. 关于基因工程过程所使用的工具，下列叙述正确的是

A.限制酶的作用是识别并切割外DNA片段中的任意序列

B.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端

C.利用质粒在宿主细胞内对目的基因进行大量扩增的过程可以称为克隆

D.含有目的基因的重组DNA分子成功导入受体细胞后，会使受体细胞发生基因突变

18.关于基因工程过程所使用的工具，下列叙述正确的是

A.限制酶的作用是识别并切割外DNA片段中的任意序列

B.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端

C.利用质粒在宿主细胞内对目的基因进行大量扩增的过程可以称为克隆

D.含有目的基因的重组DNA分子成功导入受体细胞后，会使受体细胞发生基因突变

通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：

(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即____________。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接________________。

(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是__________________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是______________；其次还要检测__________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测____________，方法是________杂交。

(5)人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断出现而与日俱增。有人认为转基因生物不会影响食物安全，你的观点呢？理由是什么？

下列基因工程的操作步骤，正确的是