质粒是基因工程中最常用的载体，它的主要特点是　

①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA

⑦能“友好”地“借居”

A．①③⑤⑦　　　 B．①④⑥　　 C．①③⑥⑦　 　 D．②③⑥⑦

（10分）ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。
第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。
第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：
（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？        。
PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                  。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                      。
（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                       酶
对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的             键打开。
（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是        ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用           制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入             可将变异株细胞筛选出来。

下图表示应用现代生物技术制备甲型H1N5病毒抗体的设想，请回答下列问题：

（1）在培育转甲型H1N5病毒抗体基因奶牛的过程中，①过程是__________________

________                        __，这是基因工程中最关键的步骤。

（2）转甲型H1N5病毒抗体基因奶牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N5病毒抗体，③过程需将受精卵培养到______________________________时期再植入母体。

（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，筛选出的Ⅱ细胞才既能______________________又能产生____________________。

（4）制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术。细胞融合常用的诱导剂是____________________________________。

（10分）绿色荧光蛋白能在紫外光的激发下发出荧光，水母中含有绿色荧光蛋白基因。2006年12月22日，我国首例3头“绿色荧光蛋白转基因猪”诞生。绿色荧光蛋白转基因猪培育过程示意图如下：

请回答相关问题。
（1）绿色荧光蛋白基因一般在基因工程中最适于做              基因。
（2）②过程所需要的酶有                     ，③表示将重组DNA导入受体细胞，常采用的方法：                    。
（3）绿色荧光蛋白转基因猪是否培育成功，需要经过鉴定。请简要写出鉴定方法，以及能说明转基因成功的现象?
（4）经过鉴定，其中有2头在转基因性状上表现明显。另一头还有待DNA鉴定，其方法是用                  制成探针，然后再进行检测。

质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是 (     )

A．①是a和b；②是a；③是b

B．①是c；②是b；③是a

C．①是a和b；②是b；③是a 

D．①是c；②是a；③是b