基因操作的基本步骤 (1)提取目的基因 基因操作的第一步是取得人们所需要的特定基因.其主要的途径有:一条是从供体细胞的DNA中直接 基因,另一条是人工 基因. 直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法 .又叫“散弹射击会 .这种方法犹如用猎枪发射的散弹打鸟.无论哪一颗弹粒击中目标.都能把鸟打下来.鸟枪法的具体做法是:用限制酶将 细胞中的DNA切成许多片段.将这些片段分别载入运载体.然后通过运载体分别转入不同的 细胞.让供体细胞所提供的DNA的所有片段分别在各个 细胞中大量复制.从中找出含有 基因的细胞.再用一定的方法把带有目的基因的 片段分离出来. 用“鸟枪法 获取目的基因的优点是操作 .缺点是工作量大.具有一定的 性.又由于真核细胞的基因含有 表达的DNA片段.不能直接用于基因的扩增和表达.因此.在获取真核细胞中的目的基因时.一般是用 基因的方法. 目前人工合成基因的方法主要有两条途径.一条途径是以 基因转录成的信使RNA为模板.反转录成互补的单链DNA.然后在酶的作用下合成 链DNA.从而获得所需要的基因.另一条途径是根据已知的蛋白质的 序列.推测出相应的 序列.然后按照碱基互补配对原则.推测出它的结构基因的 序列.再通过化学方法.以单核苷酸为原料合成目的基因. (2)目的基因与运载体结合 将目的基因与运载体结合的过程.实际上是不同来源的DNA 的过程.如果以质粒作为运载体.首先要用一定的限制酶切割质粒.使质粒出现一个切口.露出黏性末端.然后用 一种限制酶切断目的基因.使其产生相同的黏性末端.将切下的目的基因的片段插入 的切口处.再加入适量DNA连接酶.质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就会因碱基 配对而结合.形成了一个重组DNA分子. (3)将目的基因导人受体细胞 目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后.下一步是将重组DNA分子引入 细胞中进行扩增.基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌.枯草杆菌.土壤农杆菌.酵母菌和动植物细胞等. 用人工的方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞.主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径.例如.如果运载体是质粒.受体细胞是细菌一般是将细菌用 处理.以增大细菌细胞 的通透性.使含有目的基因的重组质粒进入 细胞.目的基因导入受体细胞后.就可以随着受体细胞的繁殖而 .由于细菌繁殖的速度非常快.在很短的时间内就能够获得 的目的基因. (4)目的基因的检测和表达 以上步骤完成以后.在全部受体细胞中.真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是 的.因此.必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行 .检测的方法有很多种.例如.大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因.当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒.并被转入受体细胞后就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断 细胞是否获得了目的基因. 重组的DNA分子进入受体细胞后.受体细胞必须表现出特定的 .才能说明目的基因完成了 过程. 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

基因工程操作的基本步骤,正确的顺序是(1)使目的基因与运载体结合(2)将目的基因导入受体细胞(3)目的基因的检测与表达(4)提取目的基因


  1. A.
    (4)(1)(2)(3)
  2. B.
    (3)(2)(4)(1)
  3. C.
    (4)(2)(1)(3)
  4. D.
    (3)(4)(1)(2)

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基因工程操作的基本步骤,正确的顺序是

(1)使目的基因与运载体结合

(2)将目的基因导入受体细胞

(3)目的基因的检测与表达

(4)提取目的基因

[  ]

A.(4)(1)(2)(3)

B.(3)(2)(4)(1)

C.(4)(2)(1)(3)

D.(3)(4)(1)(2)

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在基因操作的基本步骤中第一步是()


  1. A.
    基因与运载体结合
  2. B.
    提取目的基因
  3. C.
    将目的基因导入受体细胞
  4. D.
    基因表达的检测

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在基因操作的基本步骤中第一步是( )

A.基因与运载体结合

B.提取目的基因

C.将目的基因导入受体细胞

D.基因表达的检测

 

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在基因操作的基本步骤中第一步是( )

A.基因与运载体结合

B.提取目的基因

C.将目的基因导入受体细胞

D.基因表达的检测

 

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