番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

（1）过程①需要的工具酶有___________________________。

（2）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有_____________________________________。

（3）提取目的基因采用的限制性核酸内切酶的识别序列和切点是—^↓GATC—。在目的基因的两侧各有1个酶的切点，请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性未端的过程示意图。

（4）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做           ___。目的基因能在植物体内稳定遗传的关键是                         。

（5）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了___________________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

（6）培养②、③为植物组织培养过程中的_____________________。

（7）上述转基因番茄会通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染，原因是_______________________________________________。

（12分）下图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。请分析回答：

(1)过程①使用的         酶能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的           （化学键）断开。运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过                           而结合。 过程②需要用到        酶，
(2图中A的名称是____________，它重组成功的物质基础是__________________ __________的结构组成相同。
(3)A上应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动干扰素基因转录，该部位称为　　　　。为直接检测干扰素基因是否转录，可从细胞中提取　　　　__与用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交，。
（4）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成           ，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和          酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长。
（5）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GATCC—。
请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图

（18分）2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝色或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶I的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶II的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来＿＿＿＿，理由是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也是最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）从分子水平上，检测绿色荧光蛋白基因是否插入到猪胎儿成纤维染色体的DNA上，检测方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，检测绿色荧光蛋白基因是否表达，检测方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为表达载体上的＿＿＿＿＿＿＿＿。获得的转基因猪，可以解决的医学难题是可以避免＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（26分）

I．红外线CO₂分析仪可用于测定混合气体中CO₂的浓度及其变化量。将水稻的成熟绿叶组织放在密封透明的叶室内给以适宜光照，在不同CO₂浓度下测定光合作用速率。下图示光合作用增长率随CO₂浓度变化的情况，A～E是曲线上的点，请分析回答：

（1）图中光合作用增长率最大的是CD段，光合速率最快且CO₂度最低的是____点对应的值。

（2）若测定玉米的成熟绿叶组织，预计图中AB的斜率将       （填变大、变小、不变）。大田生产上，可通过               、增施农家肥料等措施保证C02的供应。

   （3）若用该装置和无色纱布测定叶片净光合速率与光照强度的关系，则主要实验设计思路是：在较强光照、温度适宜和CO₂充足的相同条件下，依次用           包裹叶室，分别测定叶片的净光合速率，并设计                      作对照组。

   （4）若下图表示玉米光合作用过程中形成NADPH和ATP的图解，下列有关叙述正确的是                         （    ）

A．虚线构成的图形代表了微管束鞘细胞中的叶绿体的囊状结构

B．在光合作用全过程中都不需要钾元素参与

C．电能转变为活跃的化学能全部储存在ATP中

D．叶绿体基粒上的色素都能吸收光能，而能把光能转换成电能的只有处于特殊状态的叶绿素a

       II．下图是将动物的生长激素基因导入细菌细胞内，产生‘‘工程菌”的示意图。请据图回答：

   （1）在“工程菌”细胞内，控制细菌合成生长激素的基因、控制细菌主要性状的基因依次存在于                、                  上。

   （2）在构建重组运载体B的过程中，需用——种限制酶切割        个磷酸二酯键。

   （3）将重组DNA分子导入细菌细胞前，通常应先用           处理受体细胞。

   （4）在该工程中若限制酶能识别的序列和切点是G‘GATCC，请画出质粒被切割形成的黏性末端。

   （5）利用基因工程产生 蛋白质药物，经历了三个发展阶段。第一阶段，将人的基因转入细菌细胞（如本题所述）；第二阶段，将人的基因转入小鼠等动物的细胞；第三阶段，将人的基因转入活的动物体，饲养这些动物，可从乳汁或尿液中提取药物，利用转基因动物尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于：处于不同发育时期的                性动物都可生产药物。

通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术使羊奶中含有人体蛋白质，下图表示了这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GATCC—。

  请回答：

（1）从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是           。人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中时需要的酶是            。

（3）人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内，原因

是             。“插入”时常用的工具是                 。