.2001年11月25日，美国先进细胞技术公司利用成人细胞首次克隆出人类早期胚胎，消息公布后，引起全世界的轩然大波；11月29日，中国卫生部明确表示：中国不赞成、不支持、不接受任何克隆人实验，赞成以治疗和预防疾病为目的的人类胚胎干细胞研究，但研究必须是有序的，并要在有效监控条件下进行。试回答：

（1）高等动物的克隆方法一般是：供体(被克隆个体)的体细胞的 + 去核卵细胞→重组细胞→早期胚胎→个体：

①“多利”采用了上述技术路线，一般认为这种生殖(繁殖)方式是_________生殖。

②获得重组细胞是______过程。

A．有丝分裂 　　　B．细胞融合 　　　　C．体外受精 　　　　D．细胞杂交

③早期胚胎→个体过程应用了___           _____技术

④克隆技术的突破说明了                                            。

⑤ “胚胎干细胞”是指胚胎发育初期具有无限增殖能力和全能分化能力的细胞。中国科学家利用牛胚胎干细胞改进了克隆技术，培育出多头克隆牛，使得工厂化生产克隆动物成为可能，其方法可能是：供体牛的细胞核+去核卵细胞→     →       →

___________→许多克隆牛

（2）全世界轩然大波，中国卫生部反对克隆人。为什么 ?   （       ）(多选题)

A．克隆立法相对滞后

B．如果克隆人早期胚胎的试验不加控制地进行下去，克隆人终将涎生

C．克隆人一旦出生,整个人伦方面观念化的东西都被推翻,同时会带来人种优化、宗教混乱等社会政治问题

D．克隆技术并不绝对成熟,不能保证克隆出无缺陷的人

E．大力推广克隆技术对保持生物多样性具有重要意义

研究发现：端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶是一种逆转录酶，能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受限），从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

　 方法思路：

　 ①构建干扰质粒　　　　　　　　　 （插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基（hTERT）的mRNA的干扰序列）和对照质粒PSG—CTR（插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列）。

　 ②将空质粒PSG（不含目的基因）、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。

　












③一段时间后观察检测细胞的　　　　　　 　　　　　　　　。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答：

　 （1）完成实验步骤中的空格：

　　　 ①　　　　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　 。

　 （2）在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用　　　　　　　 培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有　　　　　　　 。

　 （3）端粒酶可以通过以自身的　　　　　 为模板，　　　　　　　　　 为原料来合成端粒DNA。

（4）根据题意请分析实验结果并得出结论。

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

研究发现：端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶是一种逆转录酶，能延长缩短的端粒(缩短的端粒使细胞复制能力受限)，从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞的增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

方法思路：

①构建干扰质粒________(插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基的mRNA的干扰序列)和对照质粒PSG－CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。

②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。

③一段时间后观察或检测细胞的________。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线，结果如图所示。

请据图回答下面的问题。

(1)完成实验步骤中的空格：①________；③________。

(2)在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用________培养基进行筛选，鉴定后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有________。

(3)端粒酶可以通过以自身的________为模板，________为原料来合成端粒DNA。

(4)请根据题意分析实验结果并得出结论。

研究发现：端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶是一种逆转录酶，能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受限），从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。
方法思路：
①构建干扰质粒                  （插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基（hTERT）的mRNA的干扰序列）和对照质粒PSG—CTR（插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列）。
②将空质粒PSG（不含目的基因）、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的                            。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答：
（1）完成实验步骤中的空格：
①                       ；②                       。
（2）在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用              培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有               。
（3）端粒酶可以通过以自身的          为模板，                   为原料来合成端粒DNA。
（4）根据题意请分析实验结果并得出结论。
                                                                       
                                                                    。

研究发现：端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶是一种逆转录酶，能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受限），从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

    方法思路：

    ①构建干扰质粒                   （插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基（hTERT）的mRNA的干扰序列）和对照质粒PSG—CTR（插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列）。

    ②将空质粒PSG（不含目的基因）、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。

    ③一段时间后观察检测细胞的                             。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答：

   （1）完成实验步骤中的空格：

        ①                        ；②                        。

   （2）在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用               培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有                。

   （3）端粒酶可以通过以自身的           为模板，                    为原料来合成端粒DNA。

（4）根据题意请分析实验结果并得出结论。

                                                                            。