降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2，据图回答下列问题：   

（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。

（2）图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用       处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。

（3）如果要通过基因工程获得转基因动物，将目的基因导入受体细胞最常用的方法是             。

（4）以下关于蛋白质工程的说法正确的是（  ）

A．蛋白质工程以基因工程为基础          

B．蛋白质工程就是酶工程的延伸

C．蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造  

D．蛋白质工程只能生产天然的蛋白质

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2，据图回答下列问题：   

（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
（2）图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用       处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（3）如果要通过基因工程获得转基因动物，将目的基因导入受体细胞最常用的方法是             。
（4）以下关于蛋白质工程的说法正确的是（  ）
A．蛋白质工程以基因工程为基础          
B．蛋白质工程就是酶工程的延伸
C．蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造  
D．蛋白质工程只能生产天然的蛋白质

（8分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将能人工合成降钙素的DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。据图回答：

（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。

（2）图2示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图2显示的方法外还有                 。

（3）对图2中a点的操作方法为                                              。

（4）获得的双链DNA经酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

1）大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它__________________________________。

2）要进行重组质粒的鉴定和选择，大肠杆菌质粒需要含有_______________。

（5）对符合设计要求的重组质粒进行酶切，已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。仔细读图判断质粒用_____

切割。

（12分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条 72个碱基的 DNA单链，两条链通过 18个碱基对形成部分双链 DNA片段，再利用 Klenoｗ酶补平，获得双链 DNA，过程如图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

 （1）Klenoｗ酶是一种         酶，合成的双链DNA有       个碱基对。

（2）获得的双链 DNAＥcoRI（识别序列和切割位点-G↓ AATTC-）和 BamHI（识别序列和切割位点-T↓TATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行 DNA测序验证

①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它               。

②设计ＥcoRI和 BamHI双酶切的目的是               。

③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有            。

（3）经 DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                    。

   （4）人工合成的目的基因与人体内的降钙素基因在结构上不同之处在于      。

   （5）如果从人体细胞中直接提取目的基因并导入细菌中，能否获得降钙素，为什么？

（7分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用游离的脱氧核苷酸和Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。请据图回答：

（1）Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G^↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证     和     的定向连接。
②要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______________基因。
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是合成的核苷酸单链仍较长，产生     现象。
（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是____________________。