下列关于基因表达载体及其构建的叙述中，正确的有几项：
①一个表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子
②启动子位于基因的首端，有了启动子才能驱动基因转录出mRNA
③终止子位于基因的尾端，终止子的作用是使翻译在所需要的地方停止
④所有基因表达载体的构建是完全相同的
⑤抗生素抗性基因可以作为标记基因
⑥基因表达载体的构建必须在细胞内进行

Ⅰ．基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答。

（1）在基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤可能有         （用图解中的序号表示）（2分）。

（2）下列属于基因表达载体组成的是（   ）（2分）

A目的基因      B终止密码    C启动子        D标记基因     E终止子        F起始密码

（3）可用            方法将目的基因导入动物细胞。

Ⅱ．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法：

请根据图示信息回答。

（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物技术有　          和           。

（2）试管牛培育过程特有的生物技术是　     ，克隆牛培育过程特有的生物技术是　        。

Ⅲ．请回答单克隆抗体制备的有关问题：

（1）单克隆抗体制备为什么要向小鼠注入特定的抗原？　                    （2分）。

（2）单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是　　                （2分）。

（3）选出的杂交瘤细胞必须具备　　                      　　　  （2分）特点。

（11分）2003年，世界上第一个基因治疗药物“今又生”通过临床实验，被准上市。“今又生”是我国为数不多的首创药物之一，由我国科学家于1998年开始研制的。其本质是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白对高危癌前病变的DNA损伤（如FOS基因损伤）可直接或通过调控其他途径进行修复，使其恢复正常；对DNA损伤无法修复的细胞，P53蛋白则诱导其进入冬眠状态或细胞凋亡，预防细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，为腺病毒中致病力最弱的病毒株，野生型该病毒株也仅会偶致普通感冒，其基因不整合到宿主细胞基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改构，只对细胞实施一次感染，不能复制，无环境污染。
根据以上信息，完成下列问题：
（1）从题中分析，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在那些载体一般应具备的条件中，科学家选择性的放弃了一般的载体都应该具有的___________________。
（2）P53功能蛋白是由4条完全相同的肽链组装而成，每条肽链由393个氨基酸缩合而成。若考虑到翻译过程起始密码和终止密码的存在，则p53基因至少应该含有____________个核苷酸。在形成P53蛋白时，需要脱去___________个水分子，此时核糖体上不含有下列哪种结构___________。
A．密码子                                                             B．反密码子              
C．核糖核苷酸                                                      D．脱氧核苷酸
（3）试举一种人体中不含p53基因的细胞：_______________________。
（4）已知P53蛋白微量高效，只需极微量就可以完成功能，p53基因位于常染色体上。某男谢某表现型正常，但在他还是一个受精卵时，一条染色体上的p53基因突变成为无功能的假基因。若谢某和一个无遗传病史正常女性结婚，生下一儿谢晓东，晓东长大后娶了一个因p53突变导致的“易患癌症者”吴月婷，晓东和月婷准备生个娃娃，他们的娃娃是“易患癌症者”的概率应为__________________。
（5）月婷为了治病，接受了“今又生”的基因治疗。在她接受注射后两个月，从她血液中提取了P53蛋白做了电泳分析，以便和治疗前对比。但是月婷慌乱中把治疗前后的底片搞混淆了，两张底片分别如下图所示，请帮月婷判断，她的治疗_________（是、否）有效，__________（左、右）边那幅图是治疗后的电泳分析图。

（6）月婷经过“今又生”注射后，仍然不幸的在三十五岁就患了癌。根据已有资料判断，她的治疗效果不显著的最可能原因是：（   ）
A．p53基因没有整合到体细胞中                                                            
B．p53基因没有转录出mRNA
C．p53基因没有表达出P53蛋白                                                             
D．注射浓度或注射次数不够

（11分）2003年，世界上第一个基因治疗药物“今又生”通过临床实验，被准上市。“今又生”是我国为数不多的首创药物之一，由我国科学家于1998年开始研制的。其本质是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白对高危癌前病变的DNA损伤（如FOS基因损伤）可直接或通过调控其他途径进行修复，使其恢复正常；对DNA损伤无法修复的细胞，P53蛋白则诱导其进入冬眠状态或细胞凋亡，预防细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，为腺病毒中致病力最弱的病毒株，野生型该病毒株也仅会偶致普通感冒，其基因不整合到宿主细胞基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改构，只对细胞实施一次感染，不能复制，无环境污染。

根据以上信息，完成下列问题：

（1）从题中分析，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在那些载体一般应具备的条件中，科学家选择性的放弃了一般的载体都应该具有的___________________。

（2）P53功能蛋白是由4条完全相同的肽链组装而成，每条肽链由393个氨基酸缩合而成。若考虑到翻译过程起始密码和终止密码的存在，则p53基因至少应该含有____________个核苷酸。在形成P53蛋白时，需要脱去___________个水分子，此时核糖体上不含有下列哪种结构___________。

A．密码子                                                             B．反密码子              

C．核糖核苷酸                                                      D．脱氧核苷酸

（3）试举一种人体中不含p53基因的细胞：_______________________。

（4）已知P53蛋白微量高效，只需极微量就可以完成功能，p53基因位于常染色体上。某男谢某表现型正常，但在他还是一个受精卵时，一条染色体上的p53基因突变成为无功能的假基因。若谢某和一个无遗传病史正常女性结婚，生下一儿谢晓东，晓东长大后娶了一个因p53突变导致的“易患癌症者”吴月婷，晓东和月婷准备生个娃娃，他们的娃娃是“易患癌症者”的概率应为__________________。

（5）月婷为了治病，接受了“今又生”的基因治疗。在她接受注射后两个月，从她血液中提取了P53蛋白做了电泳分析，以便和治疗前对比。但是月婷慌乱中把治疗前后的底片搞混淆了，两张底片分别如下图所示，请帮月婷判断，她的治疗_________（是、否）有效，__________（左、右）边那幅图是治疗后的电泳分析图。

（6）月婷经过“今又生”注射后，仍然不幸的在三十五岁就患了癌。根据已有资料判断，她的治疗效果不显著的最可能原因是：（    ）

A．p53基因没有整合到体细胞中                                                            

B．p53基因没有转录出mRNA

C．p53基因没有表达出P53蛋白                                                             

D．注射浓度或注射次数不够