34   (8分）【生物一生物技术实践】

为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，某生物兴趣小组的 同学设计了如下实验(符合无菌操作要求）。请分析下述实验过程并回答下列问题

①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏;

②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；

③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；

④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数

(1)制备牛肉青蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、________;培养基在分装前往往要进行________________。

(2)本实验样品接种时最好采用________法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的________________.

(3 )食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌属于大肠杆菌.可选用________培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色

(4)本实验设计中的一个明显错误是________,请加以改正________

（5)证明所用培养某已经彻底灭菌的方法是________________

(8分)应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
资料1：蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
资料2：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

(1)过程①⑤所需要的工具酶有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿、启动子、终止子等部分组成。
(2)过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿。通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从＿＿＿＿中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
(3)如果将过程③获得的早期胚胎进行如图分割，则操作正确的是＿＿＿＿＿＿＿＿。

(4)通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等突出优点。

35   . (8分）【生物一现代生物科技专题】

羊绒素有“软黄金”之称，内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊是我国的两大产绒品种。我国生物 学家运用现代生物技术培育出了转基因克隆绒山羊,其过程如下图所示：

(1)在辽宁绒山羊细胞中获取的IGF-I基因在导入胚胎干细胞之前须________，这是基因工程操作的核心步骤,该操作过程必需的工具酶是________，将IGF-I基因导入胚胎干细胞最有效的方法是________

(2)转基因胚胎干细胞培养过程常在培养液中加人一定量的________.以防培养过程中的污染;同时在使用合成培养基时，为保证细胞正常生长,在培养基中还要添加________等天然成分。

(3)干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植入________的代孕母羊体内。为提高胚胎利用率，还可以采用________技术以获得更多的转基因克降绒山羊幼仔。

(4)请列举至少两种转基因克隆绒山羊培育过程中采用的现代生物技术: ________

45、（8分，每空1分）胚胎工程是一项综合性动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程

 （1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是       ；从良种公牛采集的精子需           后才能进行受精作用。
 （2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供     气体以维持              。
 （3）图中过程A称为            ，它在胚胎工程中的意义在于                 。
 （4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是            ；获得转基因母牛后，如果            即说明目的基因已经表达。

(8分)应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
资料1：蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
资料2：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

(1)过程①⑤所需要的工具酶有                   ，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由         、          、启动子、终止子等部分组成。
(2)过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是                 。   通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从            中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
(3)如果将过程③获得的早期胚胎进行如图分割，则操作正确的是               。

(4)通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有        和        等突出优点。