(二).实验设计 1.实验材料的选取 凡是含有DNA的生物材料都可以考虑.但是使用DNA含量相对较高的生物组织.成功的可能性更大. 2.破碎细胞.获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易.以鸡血细胞为例.在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水.同时用玻璃棒搅拌.过滤后收集滤液即可.如果实验材料是植物细胞.需要先用洗涤剂溶解细胞膜.例如.提取洋葱的DNA时.在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐.进行充分的搅拌和研磨.过滤后收集研磨液. 注意: ①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂? 蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体.水分可以大量进入血细胞内.使血细胞胀裂.再加上搅拌的机械作用.就加速了鸡血细胞的破裂.从而释放出DNA. ②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么? 洗涤剂是一些离子去污剂.能溶解细胞膜.有利于DNA的释放,食盐的主要成分是NaCl.有利于DNA的溶解. ③如果研磨不充分.会对实验结果产生怎样的影响? 研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全.提取的DNA量变少.影响实验结果.导致看不到丝状沉淀物.用二苯胺鉴定不显示蓝色等. ④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分? 可能含有核蛋白.多糖和RNA等杂质. 3.去除滤液中的杂质 方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质.不分解DNA,方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同. 注意: ①为什么反复地溶解与析出DNA.能够去除杂质? 用高盐浓度的溶液溶解DNA.能除去在高盐中不能溶解的杂质,用低盐浓度使DNA析出.能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此.通过反复溶解与析出DNA.就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质. ②方案二与方案三的原理有什么不同? 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白.从而使提取的DNA与蛋白质分开,方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同.从而使蛋白质变性.与DNA分离. 4.DNA的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤.加入与滤液体积相等.冷却的酒精溶液.静置2-3min.溶液中会出现白色丝状物.这就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一个方向搅拌.卷起丝状物.并用滤纸吸取上面的水分. 取两支20ml的试管.各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml.将丝状物放入其中一支试管中.用玻璃棒搅拌.使丝状物溶解.然后.向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂.混合均匀后.将试管置于沸水中加热5min.待试管冷却后.比较两支试管溶液颜色的变化.看看溶解有DNA的溶液是否变蓝. 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

根据下面实验原理和材料用具,设计实验选择运载体——质粒,探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌素类别。

实验原理:作为运载体的质粒,须有标记基因,这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌,其质粒才可能用作运载体。

材料用具:青霉素、四环素的10万个单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

方法步骤:

第一步:取三个含细菌培养基的培养皿并标号1、2、3,在酒精灯旁,用三支注射器,分别注入1毫升蒸馏水、青霉素液和四环素液,并使之分布在整个培养基表面。

第二步:将接种环在酒精灯火焰上方灼烧灭菌,并在酒精灯火焰旁取种,然后对三个培养皿接种。

第三步:将接种后的三个培养皿放入37℃的恒温箱中培养24小时。

预期结果分析:

(1)设置1号的目的是________,出现的现象是________。

(2)如果1、2、3号培养皿的细菌都正常生长,说明________;

如果1、2号培养皿的细菌能正常生长,3号培养皿的细菌不能正常生长,则说明________;

如果1、3号培养皿的细菌能正常生长,2号培养皿的细菌不能正常生长,则说明________;

如果只有1号培养皿的细菌能正常生长,2、3号培养皿的细菌都不能正常生长,则说明________.

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根据所提供材料,回答问题。

“烟草有害健康”,人人皆知。那么,能否通过实验,进一步了解烟草对微生物基因突变的影响?已知:粘质沙雷氏菌在正常情况下生长,是红色菌落;当外界因素引发粘质沙雷氏菌发生突变时,菌落将呈现白色。某校学生小组设想:若用不同浓度的烟草浸出液处理粘质沙雷氏菌,会发生什么?

供选材料及器具:粘质沙雷氏菌液,烟草浸出液母液;NaCl,蛋白胨,琼脂,4mol /L NaOH 溶液;培养皿,锥形瓶,量筒,1毫升移液管,烧杯,酒精灯,接种环,pH试纸等。

请补充、完善以下方案:

l         提出假设:

69.假设                                                   

l         实验设计:

步骤一:制备培养基

70.完成步骤一必须选用的材料是                        。(至少写出2种)

步骤二:制备烟草浸出液的稀释液

71.烟草浸出液的稀释液制备方法与要求                                           

                                                                               

步骤三:接种、培养

72.用不同浓度的烟草浸出液培养粘质沙雷氏菌;用接种环蘸取菌液以           法接种在培养基上。接种时,需要将灼烧后的接种环冷却后再取菌种,原因是                    

73.在整个实验过程中,为保证无杂菌污染,除培养基灭菌外,还需要将                   

                          等灭菌。

步骤四:观察并记录数据:

l         分析讨论

74.将可能的实验结果在下面的方框中用直角坐标图直观地表示出来(实验数据用相对值表示即可,标明纵横坐标含义):

 
 


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根据下面的实验原理和材料用具,设计实验选择运载体——质粒,探究质粒所含的抗菌素基因的类别。

实验原理:作为运载体的质粒,须有标记基因.这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性基因的细菌,其质粒才可能用作运载体。

材料用具:青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

方法步骤:

第一步:取三个含细菌培养基的培养皿并分别标注1、2、3号,在酒精灯旁,用三支注射器,分别注入1mL蒸馏水、青霉素、四环素溶液。并使之分布在整个培养基表面。

第二步:将接种环_______________________,并在酒精灯火焰旁取种,然后对三个培养皿接种。

第三步:培养。将接种后的三个培养皿放人37℃恒温箱中培养24 h。

预期结果及分析:

(1)设置1号培养皿的目的是________________,出现的现象是________

____________________________________。

(2)若仅2号中生存,则___________________________________________

__________________________________。

(3)若2号中不存活,3号中存活,则_______________________________。

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根据下面的实验原理和材料用具,设计实验选择运载体——质粒,探究质粒所含的抗菌素基因的类别。

实验原理:作为运载体的质粒,须有标记基因.这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性基因的细菌,其质粒才可能用作运载体。

材料用具:青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

方法步骤:

第一步:取三个含细菌培养基的培养皿并分别标注1、2、3号,在酒精灯旁,用三支注射器,分别注入1mL蒸馏水、青霉素、四环素溶液。并使之分布在整个培养基表面。

第二步:将接种环_______________________,并在酒精灯火焰旁取种,然后对三个培养皿接种。

第三步:培养。将接种后的三个培养皿放人37℃恒温箱中培养24 h。

预期结果及分析:

(1)设置1号培养皿的目的是________________,出现的现象是________

____________________________________。

(2)若仅2号中生存,则___________________________________________

__________________________________。

(3)若2号中不存活,3号中存活,则_______________________________。

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下面是一系列与高中生物学实验相关的图形,请据此回答问题:

(1)

如用上述有关材料做《叶绿体中色素的提取和分离》、《植物向性运动的实验设计和观察》等实验,你认为可选用的依次是________________(填写图中的序号).

(2)

用紫色洋葱做《观察植物细胞的质壁分离与复原》实验时,选用的是它的鳞片叶表皮细胞,原因是其细胞中具有________.E图为实验中观察到的一个经第二次加清水处理后的细胞示意图,原生质层由其中的________组成.(填写图中的序号)做《观察植物细胞的有丝分裂》实验时,观察部位则是洋葱的________,细胞大多处于F图中的________时期.

(3)

G图是《DNA的粗提取与鉴定》实验中的一个步骤,此时加蒸馏水的目的是________

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同步练习册答案