（除特别标示外，每空1分，共7分）在氮源为¹⁴N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为¹⁴N—DNA(对照)；在氮源为¹⁵N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为¹⁵N—DNA(亲代)。将亲代大肠杆菌转移到含¹⁴N的培养基上，再连续繁殖两代(Ⅰ和Ⅱ)，用某种离心方法分离得到的结果如图所示：

(1)由实验结果可推测第一代(Ⅰ)细菌DNA分子中一条链含　　　　；另一条链含　　　　　。

(2)将第一代(Ⅰ)细菌转移到含¹⁵N的培养基上繁殖一代，将所得到细菌的DNA用同样方法分离，请参照甲图，将DNA分子可能出现在试管中的位置在乙图中标出。（2分）

(3)若一个DNA分子的一条单链中A占32%，且＝1.5，此比例在其互补链中的比值是　　　　；在整个DNA分子中的比值是　　　　。以该单链为模板合成的子代DNA分子中，A＋G的总含量占双链DNA的比例为　　　　　　。

请分析回答下列有关基因工程问题：

Ι 基因工程是按人们预先设计的蓝图，将目的基因通过一定方法导入到另一种生物的细胞中，使之产生符合人类需要的新的遗传性状或创造出新的生物类型的现代技术。

57.基因工程常用的三种工具为限制性内切酶、　　　　　　 、质粒，通常选择质粒作为“目的基因的运输载体”是由于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

58.基因工程一般包括四步：获取目的基因；目的基因与运载体重组；　　　　　　　 ；

　　　　　　　　　 　　。

Ⅱ 在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR如右图示，包括三个基本反应步骤：①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后双链解离；②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得较多的目的基因。

59.温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物时所遵循的原则是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

60.在PCR技术中，引物的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

61.从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为　　　　　　　　 。

62.下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物。则至少需要在　　　 轮循环产物中才能开始出现独立且完整的的X基因。如果经过n次循环，则产物中①所示DNA分子数为　　　　　　 。

63.用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

科学家从某耐盐植物中得到耐盐基因（R），培育出耐盐转基因农作物。回答下列问题：

（1）在基因工程中，耐盐基因（R）被称为?????? ????????????? 。

（2）如果用农杆菌转化法将R基因导人农作物细胞，应先将R基因插入农杆菌的????????????? ????? 中，然后用该农杆菌感染农作物细胞，将R基因插入农作物细胞的????????????? ???????? 上。

（3）上述过程中用到的DNA连接酶分为两类，其中T4DNA连接酶既能连接双链DNA分子片段的????????????? ? ，也能连接????????????? ??? 。DNA连接酶的功能是连接两个脱氧核苷酸之间的????????????? ? 。

（4）若得到的耐盐转基因农作物的基因类型有甲、乙两种，R基因的整合位点如图（只考虑其中的两对染色体，R基因都能正常表达）。让植株自花传粉（植株的减数分裂正常，且不考虑交叉互换），会产生含两个R基因配子的植株为图????????????? ?????????????? 类型；若子代耐盐植株所占比例为100%，则R基因的整合位点属于图????????????? ???????? 关型。

　　遗传的物质基础中的计算

　　（1）碱基互补配对原则在计算中的作用

　　规律一：一个双链DNA分子中，A=T，G=C，A+G=C+T，即嘌呤碱基总数=嘧啶碱基总数

　　规律二：在双链DNA分子中，互补的两碱基和（如A+T或C+G）占全部碱基的比等于其任何一条单链中该种碱基比例的比值，且等于其转录形式的mRNA中该种比例的比值。

　　规律三：DNA分子一条链中(A+G)/(C+T)的比值的倒数等于其互补链中该种碱基比例的比值。

　　规律四：DNA分子一条链中互相配对的碱基和的比值，如(A+T)/(G+C)等于其互补链和整个DNA分子中该种碱基比例的比值。

　　（2）DNA复制所需的某种碱基（或游离的脱氧核苷酸）数=m·（2n-1），m代表所求的该种碱基（或脱氧核苷酸）在已知DNA分子中的数量，n代表复制次数。

　　（3）用同位素标记模板，复制n次后，标记分子所占比例为2/2n，标记链所占的比例为1/2n；用同位素标记原料，复制n次后，标记分子所占比例为1，标记链所占比例为1-1/2n。

　　例8．一双链DNA分子中G+A=140，G+C=240，在以该DNA分子为模板的复制过程中共用去140个胸腺嘧啶脱氧核苷酸，则该DNA分子连续复制了几次？（   ）

　　　A．1次   B．2次   C．3次   D．4次

　　例9．（2006上海）用一个32P标记的噬菌体侵染细菌。若该细菌解体后释放出32个大小、形状一样的噬菌体，则其中含有32P的噬菌体（   ）

　　　A．0个   B．2个   C．30个   D．32个

　　例10．某DNA分子中含有1000个碱基对（P元素只含32P）。若将DNA分子放在只含31P的脱氧核苷酸的培养液中让其复制两次，则子代DNA的相对分子质量平均比原来（   ）

　　　A．减少1500  B．增加1500  C．增加1000  D．减少1000

（10分）在氮源为¹⁴N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为¹⁴N—DNA(对照)；在氮源为¹⁵N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为¹⁵N—DNA(亲代)。将亲代大肠杆菌转移到含¹⁴N的培养基上，再连续繁殖两代(Ⅰ和Ⅱ)，用某种离心方法分离得到的结果如图所示：

(1)由实验结果可推测第一代(Ⅰ)细菌DNA分子中一条链含　　　　；另一条链含　　　。
(2)将第一代(Ⅰ)细菌转移到含¹⁵N的培养基上繁殖一代，将所得到细菌的DNA用同样方法分离，请参照甲图，将DNA分子可能出现在试管中的位置在乙图中标出。（2分）
(3)若一个DNA分子的一条单链中A占32%，且＝1.5，此比例在其互补链中的比值是　　　　；在整个DNA分子中的比值是　　　　。以该单链为模板合成的子代DNA分子中，A＋G的总含量占双链DNA的比例为　　　　　　。