水稻种子中70%的磷以植酸形式存在．植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子；同时，排出的大量磷进入水体易引起水华．
（1）磷元素除了形成植酸外，还可以出现在下列分子或结构中（多选）．
A．核糖      B．ATP       C．核糖体       D．核膜
（2）种植芦苇能有效抑制水华的发生，表明芦苇与引起水华的藻类关系是．
（3）植酸酶可降解植酸，在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的利用率．
（4）酵母菌中植酸酶的活性较高．如图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程．
据图回答：
①植酸酶（Ⅰ/Ⅱ）属于分泌蛋白．
②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽链组成不同，其差异体现在．
③提纯的植酸酶需做活性条件测定，如图为测定结果．图中的自变量可为（答一种）；因变量可以通过测定来表示．
（5）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种．如图是获取植酸酶基因的流程．
据图回答：
①图中基因组文库（小于/等于/大于）cDNA文库．
②B过程需要的酶是；A、C过程中（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株．
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中和为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是．
（6）已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病．如图为选育低植酸抗病水稻品种的过程．图中两对相对性状分别由两对基因控制，并独立遗传．

采用图中育种过程，需从代开始筛选，经筛选淘汰后，在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是．选留植株多代自交，经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品种．

将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力．以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表．

请根据以上图表回答下列问题．
（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是．
（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定．表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图．请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？．
（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？．
（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为．
（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，．假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断．
①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到种DNA片断．
②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到种DNA片断．

生物技术实践
（1）商品化植酸酶主要来自微生物．在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性．活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间表示．
（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：

Ⅰ中的主要成分为；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质．请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据．
（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因．PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：．反应过程中打开模板DNA双链的方法是．
（4）除植酸酶外，微生物还应用在的生产中．

登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克．科学家用以下方法控制病毒的传播．
（1）将S基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达S蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制．为了获得转基因蚊子，需要将携带S基因的载体导入蚊子的细胞．如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出、和．
（2）科学家获得一种显性突变蚊子（AABB）．A、B基因位于非同源染色体上，只有A或B基因的胚胎致死．若纯合的雄蚊（AABB）与野生型雌蚊（aabb）交配，F1群体中A基因频率是，F2群体中A基因频率是．
（3）将S基因分别插入到A、B基因的紧邻位置（如图），将该纯合的转基因雄蚊释放到野生群体中，群体中蚊子体内病毒的平均数目会逐代，原因是．

（生物一现代生物科技专题）
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：
请回答：
（1）过程①代表的是．
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用和两种工具酶．
（3）过程③采用的实验技术是，获得的X是．
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行比较；或用图中的进行特异性结合检测．

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的和之间．
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、和．
（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．

酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用．蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取．为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表．请回答有关问题．

试管编号 项目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	O	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果胶酶液（mL）	O	0	O	0.5	O	0
蜗牛酶液（mL）	O	0	O	O	0.5	0
纤维素酶液（mL）	0	O	0	O	0	0.5
实验结果 （绿色深浅程度）	-	-	-	+++	++++	++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅．
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有  等多种酶．该实验中 是空白对照组，其设置意义是．
（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用  洗涤．
（4）原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是．

2007年我国科学家率先完成了家蚕基因组精细图谱的绘制，将13000多个基因定位于家蚕染色体DNA上，请回答以下有关家蚕遗传变异的问题：
（1）在家蚕的基因工程实验中，分离基因的做法包括用对DNA进行切割，然后将DNA片段与结合成重组DNA，再将重组DNA转入大肠杆菌进行扩增等．
（2）家蚕的体细胞共有56条染色体，对家蚕基因组进行分析（参照人类基因组计划要求），应测定家蚕条双链DNA分子的核苷酸序列．
（3）决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对．其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，该序列叫；剩下的序列最多能编码个氨基酸（不考虑终止密码子），该序列叫．
（4）为了提高蚕丝的产量和吕质，可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步的选育来完成．这些变异的来源有．
（5）在家蚕遗传中，黑色（B）与淡赤色（b）是有关蚁蚕（刚孵化的蚕）体色的相对性，黄茧（D）与白茧（d）是有关茧色的相对性状，假设这两对性状自由组合，杂交后得到的子代数量比如下表：

子代 亲本	黑蚁黄茧	黑蚁白茧	淡赤蚁黄茧	淡赤蚁白茧
组合一	9	3	3	l
组合二	O	1	0	l
组合三	3	O	l	O

①请写出各组合中亲本可能的基因型：
组合一：；  
组合二：；
组合三：．
②让组合一杂交子代中的黑蚁白茧类型自由交配，其后代中黑蚁白茧的概率是．

湿地是地球上生物生产力最大的生态系统之一．它是天然的蓄水库，并能过滤和分解水中的污染物进而改善水质，被喻为’地球之肾”．湿地类型众多，如红树林、河流、湖泊和稻田等．
（1）湿地由于其特殊的水文及地理特征，具有和等生态功能．
（2）在红树林等湿地生态系统中，碳元素主要通过：过程被固定在有机物中，并沿着进行传递．
（3）与生物多样性丰富的湖泊相比，稻田的稳定性较低．
（4）调查表明，我国相当一部分湖泊已不同程度富营养化，原因是含氮、磷等元素丰富的污染物的排放量超过了湖泊的限度，使其自动调节能力下降．富营养化水体中造成鱼类大量死亡的原因有，等．

T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变．用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化．在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）．
（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除，因为后者产生的会抑制侧芽的生长．
（2）为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T₂代）．
（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含的培养基上，获得所需个体．
（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体．为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与植株进行杂交，再自交代后统计性状分离比．
（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性．
（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段．其过程是：提取植株的DNA，用限制酶处理后，再用将获得的DNA片段连接成环（如图），以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息．