【生物技术实践专题】如表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏、蛋白胨培养基的配方．

试 剂	用 量	试 剂	用 量
牛肉膏	5g	琼脂	20g
蛋白胨	10g	水	1000mL
NaCl	5g	--	--

（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、和无机盐．上述培养基配方中能充当碳源的成分是．
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是和两种．在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是．
（3）假设某同学发现培养基上细菌数目过多连成一片，说出一种可能的原因并提出合理的处理措施：原因：；措施：．
（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则大肠杆菌的增长呈现型曲线增长．
（5）该培养基能否用于筛选土壤中的纤维素分解菌？．在筛选纤维素分解菌时，常加入的一种染料是，该染料可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，所以可以通过是否产生来筛选纤维素分解酶．

【现代生物科技专题】人们应用生物工程技术可以获得所需要的生物新品种或新产品．请据图回答下列问题：

（1）获得抗虫基因的常用方法是，然后利用进行大量扩增；而获取人胰岛素基因还可通过法进行人工合成．
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素技术中图⑤所示过程一般要先用处理受体细胞，然后进行细胞转化．人们发现利用大肠杆菌生产的胰岛素活性往往较低，可能的原因是．
（3）利用基因工程生产单克隆抗体时，一般采用技术将无限增殖基因导入细胞中，然后进行和筛选出分泌所需抗体的特定细胞进行扩大培养，进而提取单克隆抗体．
（4）单克隆抗体还可以通过培养由融合而成的杂交瘤细胞进行大量制备．

图乙表示图甲所示池塘受污染后在人为干预下恢复过程的能量流动图（单位为10³kJ/m²?y），请回答：
（1）该池塘的不同水层分布着不同的生物，属于群落的结构，影响该结构的主要环境因素是．
（2）输入该生态系统的能量主要是，第一营养级到第二营养级的能量传递效率为（保留一位小数）．
（3）图乙中A表示，图中未利用的能量在生物体内的存在形式是．
（4）消费者需要补偿能量输入的主要原因是．
（5）该池塘被轻微污染后，通过自身的，很快恢复到接近原来的状态．随着时间的推移，池塘内物种的数目即不断提高．

如图表示某高等动物激素的分泌及作用机制，甲～丙表示器官，a～e表示激素或大分子物质．请回答下列问题：
（1）当温度感受器受到寒冷刺激时，就会出现a→b→激素①分泌的现象，这体现了激素分泌的特点．激素①主要通过影响核内过程来调节生命活动．
（2）若结构乙表示胰岛A细胞，结构甲可直接调节乙影响激素②的合成与分泌，该过程直接作用于乙的化学物质是，激素②作用的靶细胞主要是肝细胞，其引起的主要代谢变化是，血糖升高．
（3）c→d所需的原料是．动物体内需要源源不断地产生激素，以维持激素含量的动态平衡，原因是．
（4）当较长时间饮水不足时，机体内的增高，刺激甲中的感受器，由甲分泌激素作用于靶器官，以保持体内的水分．

【现代生物科技专题】
如图是对牛胚胎所作的技术处理，请据图分析回答：
（1）图中所示牛的胚胎发育处于时期．其中A、C、D代的结构名称分别是：A；C；D．
（2）甲过程代表的技术是，操作时的技术关键是，该技术在实践中的主要应用意义是；乙过程取滋养层可用于．

分析有关遗传病的资料，回答问题．
图为某家族的遗传系谱图，已知 I-2不携带致病基因，II-4同时患甲病（A-a）和乙病（B-b），两致病基因可连锁遗传．

（1）甲病遗传方式是．仅考虑甲病，II-4与 II-5的后代中出现患病男孩的概率是．
（2）乙病是由（显/隐）性基因控制的遗传病，判断的依据是．
（3）II-4减数分裂过程中，基因遵循定律，产生种配子．
（4）II-4与 II-5再生一个女孩，同时患两种病的概率比仅患甲病的概率，原因是．
（5）如果 II-4与 II-5生出与 III-7表现型相同孩子的概率为p，则他们生出与 III-8表现型相同孩子的概率为．

回答下列有关生物进化和生物多样性的问题．
某植物种群的一个相对性状由等位基因A和a控制，A对a完全显性．只考虑这一个相对性状时，该种群中隐性个体占20%，纯合个体占50%．
（1）该植物种群中A的基因频率是．
（2）若该植物自交，子一代中AA、aa基因型频率为、．这时A的基因频率是．
（3）依现代生物进化理论，这种植物在两年中是否发生了进化？．判断理由是．
（4）进化的单位是，进化的原材料由提供，生物进化方向决定于，进化的实质是．

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题．
资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达，图中质粒上5′AOX1和3′AOXI（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子．
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作运载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达．

资料3：限制酶切位点

限制酶	识别序列及酶切位点
SnaBⅠ
AcrⅡ
SacⅠ
BalⅡ

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上、限制酶识别序列，这样设计的优点是．
（2）酶切获取基因后，需用将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌中，以获取．
（3）步骤3中应选用限制酶来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用法进行检测．
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是蛋白质合成后，细胞可以对其进行并分泌到细胞外，便于提取．

小鼠是遗传学研究常用的实验材料，其性别决定方式为XY型．下面是关于小鼠某些性状的遗传实验，请分析回答：
（1）正常小鼠体内常染色体上的B基因可以编码胱硫醚y-裂解酶（G酶），该过程包括和两个基本步骤：正常情况下小鼠体液中可以产生少量H₂S，在G酶的催化下生成H₂S的速率加快，G酶提高该反应效率的机理是．
（2）已知小鼠毛色的黄与灰由等位基因B、b控制，尾形的弯曲与正常由等位基因T、t控制，两对基因独立遗传．在毛色遗传中，具有某种纯合基因型的合子不能完成胚胎发育．从鼠群中选择多只基因型相同的雌鼠与多只基因型相同的雄鼠杂交，所得F₁的表现型及比例如下表所示，则：

	黄毛尾弯曲	黄毛尾正常	灰毛尾弯曲	灰毛尾正常
♂	2 12	1 12	1 12	1 12
♀	4 12	0	2 12	0

①毛色遗传中不能完成胚胎发育的纯合基因型是，判断的理由是．
②亲本的基因型分别是．
③若F₁中出现了一只正常尾雌鼠，欲通过杂交实验探究这只雌鼠是基因突变的结果还是由环境因素引起的，请写出能达到这一目的杂交亲本的性状组合，并预期实验结果．
亲本性状组合：．
预期实验结果：
Ⅰ若是由基因突变导致，则杂交后代的表现型为；
Ⅱ若是由环境因素导致，则杂交后代的表现型为．

【生物技术实践】
“烟台苹果”全国闻名，烟台北方安德利果汁股份有限公司就是以苹果为原材料，主要生产浓缩果汁、果酒、果干、香精和果胶等产品．工厂利用苹果生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程如下图所示，请分析回答：
苹果

预处理

果汁

发酵

果酒

发酵

果醋
（1）用苹果加工成果汁的过程中，为了提高苹果的出汁率并使果汁变得澄清，在预处理时需要加入；同时为了使其得到充分利用，节约成本，需要控制好．
（2）苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的．果汁发酵后是否有酒精产生，可用来检验．
（3）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括．
A．温度控制  B．溶氧控制  C．pH控制  D．酶的控制
（4）下列方案能对发酵过程中使用的菌种进行分离的是．
A．用纤维素为唯一碳源的培养基上进行筛选
B．用尿素作为唯一氮源的培养基上进行筛选
C．在常规培养基中加入青霉素进行筛选
D．在小麦试验田中喷洒赤霉素进行筛选
（5）苹果酒在的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中，发酵温度要严格控制在；同时要适时向发酵液中充气，原因是．