研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答

1.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体，原因是                          ；如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为        。

2.图甲中在构建重组载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是                。

3.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是              ， 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是    ，这 两种酶作用的化学键都是          。

4.EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分（组织细胞分散开），重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时，需要用　　 　　酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

6.研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是　　                               　    　。

7.下图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体。如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组，并将重组质粒导入原本无amp^R和tet^R  的大肠杆菌进行培养。为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌，现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是___       _____ ，图三结果显示，多数大肠杆菌内导入的是___            __。

【2011·南京一模 】下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程。请据图回答下列有关问题：

（1）若限制酶l的识别序列和切点是，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是GATCC- 那么在①过程中，应用限制酶___                 ___切割质粒，用限制酶 ___                 ___ 切 割抗虫基因。①过程在___        ___ (体内／体外)进行。

（2）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有__          ___ 的培养基h，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入，该培养基从功能方面属于___           __ 培养基。

（3）重组质粒导人大肠杆菌的目的是 __                  ___。

（4）经筛选分析该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，因此可以把它看怍是杂合子。理论上该转基因植株自交产生的F1代中，优具有抗虫特性的植株占总数的  ___            ___。

（5）⑤过程所用技术称为___         __，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有 ___          __。

酵母菌是一类单细胞真菌，与人们的日常生活密切相关，在酿造、医药、工业废水的处理等方面都起着重要的作用。

（1）我国利用废弃的秸杆作为原料生产出了生物乙醇．可作为普通汽油的良好替代品。其主要技术流程为：酶解——酵母菌发酵——蒸馏——成品。下列叙述合理的有    （多选）。

       A．对秸杆进行“酶解”主要利用的是纤维素酶

       B．将秸杆作为原料可使能量得到更有效的利用

       C．乳酸菌可以代替酵母菌用于生物乙醇的生产

       D．“酵母菌发酵”环节需严格控制发酵罐中的氧气供应

（2）干扰素是人体淋巴细胞受到病毒侵染后释放的一种              ，几乎能抵抗所有病毒引起的感染。利用基因工程合成干扰素的过程中，大肠杆菌和酵母菌均可作为受体细胞，但利用              合成的干扰素不能以分泌物的形式获得。

（3）酵母菌可用于食品加工业的废水处理，废水中的淀粉或废糖可为酵母菌的生长提供                类营养物质同时由于酵母菌细胞蛋白质含量高，生长繁殖速度快，通过发酵可获得大量微生物菌体．这种微生物菌体又称做              ，可作用饲料或食品添加剂。为探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化，某兴趣小组按下表完成了有关实验．并定期对培养液中的酵母菌进行计数，根据多次计数的平均值绘制出酵母菌细胞数目变化曲线图（下图）。请回答。

该小组探究的课题是       。该实验设计中存在的不足之处是           。图中最可能代表A组酵母菌种群数量变化的曲线是           。