Question

【题目】刚果红能够与纤维素形成红色复合物，可用其鉴定纤维素分解菌。某研究小组将滤纸埋在土壤中，30天后从滤纸上取6g土壤样品加入30mL生理盐水中溶解，得到了富有纤维素分解菌的菌原液，并进行如下实验，回答下列问题：

（1）稀释菌原液：为确定合适的稀释倍数，小组成员取1mL菌原液进行如下图所示的操作。若该稀释倍数下平板上的平均菌落数为38个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为_____________个。该数字往往比活菌的实际数值低，除了因为在涂布过程中有少数细菌粘在涂布器上以外，还可能的原因是__________________________。

（2）培养基的准备：先对培养基用_____________法灭菌处理，待培养基冷却至50℃左右时倒平板，在培养基凝固_____________（填写“之前”或“之后”）加入灭菌的刚果红。从功能上来看，该培养基属于_____________培养基。

（3）接种与观察：在无菌条件下，用移液枪取0.1mL稀释后的菌悬液进行图1中_____________所示的操作，室温放置2~3分钟后倒置于恒温箱中培养。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小，图2中d/D的值越_____________，表示该菌对纤维素分解能力越强。

Answer 1

【答案】3.8×106 平板上的一个菌落可能由2个或多个细菌连在一起形成 高压蒸汽灭菌 之前 鉴别 甲 小

【解析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。

（1）由图可知，菌液稀释了10000倍，0.1ml菌液中平均菌落数为38个，故每毫升菌原液中的细菌数大约为3.8×106个。稀释涂布平板法计数时，当2个或多个细菌连在一起观察到的是一个菌落，故比实际结果偏低。

（2）需要用高压蒸汽灭菌对培养基进行灭菌处理，待培养基冷却至50℃左右时倒平板，需要在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后，会产生透明圈，可以根据透明圈的大小判断纤维素分解菌的分解能力，该培养基属于鉴别培养基。

（3）在无菌条件下，用移液枪取0.1mL稀释后的菌悬液进行图1中甲操作，在室温放置2~3分钟后倒置于恒温箱中培养，使菌液充分被培养基吸收。纤维素分解菌的分解能力越强，图2中d/D的值越小，即透明圈越大。