[题目]丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物.其作用机制之一是诱导细胞凋亡.以下是相关的实验研究过程及结果:实验材料:人肝癌细胞(HepG2).培养液.0.02%二甲亚砜溶液.用0.02%二甲亚砜溶解的0.5 ug/mL.1 ug/mL.1.5 ug/mL的丹参酮溶液.培养瓶等.①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液.分别接� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液，0.02%二甲亚砜溶液，用0.02%二甲亚砜溶解的0.5 ug/mL、1 ug/mL、1.5 ug/mL的丹参酮溶液，培养瓶等。

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h，静置、去掉上清液；

②______________，再加入等量的培养液，于37 ℃、5% CO2培养箱中继续培养；

③培养72 h，每24 h用细胞计数仪检测癌细胞数。

（1）请完善上述实验步骤中相关内容。____________________________________

（2）本实验的自变量是________________。

（3）设对照组癌细胞增殖率为100%，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（%）＝[（用药组各时段癌细胞数－用药组开始癌细胞数）/（对照组各时段癌细胞数－对照组开始癌细胞数）]×100。得到以下数据：

表1 丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响（%）

组别		培养时间/h
		24	48	72
对照组		100	100	100
给药组 ug/mL	0.5	78	62	48
	1.0	68	26	21
	1.5	48	12	5

①请将表中前48 h的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图。

②通过数据和柱形图分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：___________。

（4）将培养48 h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到对照组和给药组48 h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl－2的表达量如表所示：表2 丹参酮对HepG2细胞周期、凋亡率及凋亡蛋白基因Bax和Bcl－2的表达的影响

组别	G1	S	G2＋M	凋亡率	Bax	Bcl-2
对照组	55%	36%	9%	5.6%	28%	53%
实验组	67%	24%	9%	32.6%	37%	38%

据此推测，丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于________期。丹参酮可能通过促进HepG2内________的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。

（5）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置_______________________给药组才能得出结论。

【答案】

（1）分别加入等量的0.02%二甲亚砜溶液，用 0.02%二甲亚砜溶解的0.5 ug/mL、1 ug/mL、1.5 ug/mL的丹参酮溶液

（2）丹参酮的浓度与作用时间

（3）①

②丹参酮浓度越高，对细胞生长的抑制作用越强；作用时间越长，对细胞生长的抑制作用越强

（4）G1 Bax基因

（5）顺铂用药组和丹参酮联合顺铂用药组

【解析】

（1）根据题意可知，丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，并且实验材料中提供了“用 0.02% 二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液”，因此为了保证单一变量原则，第二步中应分别加入等量的 0.02% 二甲亚砜溶液，用 0.02% 二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液。

（2）根据实验设计可知，本实验的自变量是丹参酮的浓度，同时在观察实验结果时“每24h用细胞计数仪检测癌细胞数”，因此作用时间也属于实验的自变量。

（3）①题干要求将表中前48小时的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图，因此根据表格中的数据画图即可：

②通过数据和柱形图分析可知，丹参酮浓度越高，对细胞生长的抑制作用越强；作用时间越长，对细胞生长的抑制作用越强。

（4）表格中看出，实验组的G1期细胞比例增多，S期的细胞比例减少，因此可以推测丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于G1期。并且表格中凋亡蛋白Bax表达量增多，而细胞的凋亡率增加，因此可以推测丹参酮可能通过促进HepG2内的bax基因表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。

（5）若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置顺铂用药组和丹参酮联合顺铂用药组给药组才能得出结论。

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（3）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件包括____ 。（至少写出两项）

（4）下列方案能对发酵过程中使用的菌种进行分离的是____。

A．用纤维素为唯一碳源的培养基上进行筛选

B．用尿素作为唯一氮源的培养基上进行筛选

C．在常规培养基中加入青霉素进行筛选

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（1）现有纯合红色玉米粒，请在右图中画出基因在染色体上可能的位置关系。（注：方框内只要画出与上述基因相关的染色体，用竖线表示染色体，黑点表示基因的位点，并标上相应的基因符号）。

（2）若红色的籽粒长成的某一玉米植株自交，所结籽粒的性状分离比为紫：红：白＝0：3：1，则该植株的基因型为 ,并用一个遗传图解解释。

（3）若某一基因型为AaBbDd的玉米植株自交，所结籽粒的性状及分离比为。

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组别	第1-3天			第4-9天		第10天
	叶面喷洒	日温/夜温	光照	日温/夜温	光照	分组	检测
A	H2O	25℃/18℃	适宜	25℃/18℃	适宜	A1	光合速率
						A2	G基因表达量
B	？	25℃/18℃	适宜	18℃/12℃	弱光	B1	光合速率
						B2	G基因表达量
C	SA	25℃/18℃	适宜	18℃/12℃	弱光	C1	光合速率
						C2	G基因表达量