Question

【题目】回答下列有关遗传信息传递与表达的问题． 为制备目的基因Y（图1）与质粒X（图2）的重组DNA，将质粒X与含Y的DNA片段加入含有限制性核酸内切酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的反应混合物中，酶切后的片段再加入含有连接酶的反应体系中．其中，质粒X含有leu2基因，可用于合成亮氨酸，目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR

（1）根据图3分别写出BgⅠⅡ与BamHⅠ酶切后形成的末端序列：、 ．
（2）BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y能够连接的原因是 ． 将连接后的产物转化入一种Z细菌，Z细菌对卡那霉素敏感，且不能在缺乏亮氨酸的培养基中培养．
（3）使用BgⅠⅡ处理重组质粒，可以得到 ．
A.长度为3300bp的环状DNA
B.长度为3300bp的线形DNA
C.长度为2800bp和500bp的线形DNA
D.长度为2800bp的环状DNA
（4）要筛选含有重组质粒的Z细胞，应选择 ．
A.卡那霉素和亮氨酸均含的培养基
B.卡那霉素和亮氨酸均不含的培养基
C.含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基
D.含亮氨酸但不含卡那霉素的培养基．

Answer 1

【答案】
（1）；
（2）酶切后产生相同的黏性末端，并遵循碱基互补配对原则
（3）A
（4）C
【解析】解：（1）限制酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的识别序列及切割位点如图： ，因此它们切割形成的末端序列依次为： 、 ．（2）BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y具有相同的黏性末端，根据碱基互补配对原则，它们能够连接形成重组DNA．（3）BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因形成的重组DNA分子上没有BgⅠⅡ酶的识别序列，因此使用BgⅠⅡ处理重组质粒，可以得到长度为3300bp的环状DNA．（4）由于质粒X含有leu2基因，可用于合成亮氨酸，目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR，因此要筛选含有重组质粒的Z细胞，应选择含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基．
【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术才能正确解答此题．