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    【题目】某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：

    (1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下：

    牛肉膏

    蛋白胨

    NaCl

    琼脂

    蒸馏水

    5.0 g

    10.0 g

    5.0 g

    20.0 g

    定容至1 000 mL

    其中提供氮源的是_________________。微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时，溶化后灭菌前还应注意____________。

    (2)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入___________中灭菌，先把锅内水加热煮沸并将其中原有____________彻底排出后将锅密闭。灭菌压力100kPa，温度__________，时间15～30min。灭菌完毕后如果棉塞上沾有培养基，此试管应________。

    (3)如图为倒平板操作过程，操作时要待培养基______________________________时，在酒精灯火焰附近进行。制备固体培养基时，要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要目的是__________________________________________________。

    【答案】牛肉膏、蛋白胨 调节pH 高压蒸汽灭菌锅 冷空气 121℃ 废弃 冷却至50℃左右 防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染

    【解析】

    制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌。微生物的实验室培养的关键在于防止杂菌污染，平板冷凝后要将平板倒置，其原因是防止皿盖冷却水倒流入培养基而造成污染。

    （1）制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料主要有牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐和琼脂等。配方中能够提供氮源的是蛋白胨和牛肉膏，其中牛肉膏还可以提供能源。微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时，溶化后灭菌前还应注意调节pH，以满足不同微生物生长对pH的需求。
    （2）培养基灭菌应用高压蒸汽灭菌法，故配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入高压蒸汽锅中灭菌。使用高压蒸汽灭菌锅时应注意，先向锅内倒入适量的水，把锅内水加热煮沸并将其中原有的冷空气彻底排出后再将锅密闭。进行高压蒸汽灭菌的条件是压力100kPa，温度121℃，时间15～30min。灭菌完毕后如果棉塞上沾有培养基，为防止培养基污染，此试管应废弃掉。
    （3）倒平板时要待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行。制备固体培养基时，要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。

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    （1）上述操作过程中的接种方法是______________。

    （2）根据菌落特征鉴别微生物时，能够观察的菌落特征有_____________（多选）。

    A．形状 B．颜色 C．隆起程度 D．大小

    实验二：在液体中，酵母菌比霉菌生长快；而酸性培养基中酵母菌比细菌生长更适宜。下述方案将酵母菌从酒曲中进行了分离。用小刀切开曲块，挖取米粒大小一块投入酸性蔗糖豆芽汁培养液中，然后置于25℃培养箱中培养两天。

    （1）酸性蔗糖豆芽汁培养液的成分包括黄豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物质主要是___

    （2）上述实验操作中，需要灭菌的有_______________________。

    实验三：取浑浊的培养液1mL转接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培养液中并培养，如此重复多次。多次转接后，取稀释液用图所示方法接种在蔗糖豆芽汁平板上。

    （1）图中所用接种方法是____________________。

    （2）与酸性蔗糖豆芽汁培养液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培养基中少了乳酸，多了琼脂。这种成分改变的原因是：_________________________________________________________

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