Question

14．回答下列有关微生物工程的问题．
乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值．乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

（1）表的培养液pH均为7.0，若要筛选微生物L，则不能选择表中的ABC培养液．（多选）

培养液	乳糖	乳糖酶	NaNO2	牛肉膏	K2 HP0	KCl	MgS4O•7H2O	FeS04
A	25g/L	/	/	/	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B	/	/	3g/L	/	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1ug/L	/	3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L	/	3g/L	/	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

（2）为了获得能产乳糖酶的微生物L的单菌落，可采用划线法或稀释涂布法法将初筛菌液接种在固体培养基上．
（3）扩大培养微生物L时，通过增加营养物质的比例不可以（可以/不可以）提高种群密度，分析说明原因扩大培养的液体培养基由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长．
（4）在乳糖酶提取纯化的过程中，应及时检测酶活力或酶活性．将酶固定化后，则有利于酶的回收再利用．

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图，推测菌株J4更适合用于发酵，理由是发酵过程中会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高．

Answer 1

分析 本题是对常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用的综合性考查，回忆常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用，然后结合问题进行解答．

解答 解；（1）分析题干信息可知，该实验的目的是筛选微生物L，因此所用的培养基应该是乳糖作为唯一碳源的培养基，且培养基的基本成分应包括碳源，氮源、水和无机盐，分析性表格中的培养基的成分可知，A培养基缺乏氮源，微生物不能生长；B没有碳源，微生物应为无法生长，C不是以乳糖为唯一碳源，牛肉膏也可以作为碳源，因此A、B、C不能用于对筛选微生物L的培养基．
（2）接种微生物常用划线法或稀释涂布法，可将初筛菌液接种在固体培养基上．
（3）由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长，故扩大培养微生物L时，不能通过增加营养物质的比例 提高种群密度．
（4）在乳糖酶提取纯化的过程中，应及时检测酶活力或酶活性．将酶固定化后，则有利于酶的回收再利用．
（5）由于发酵过程中会产热和产酸，据图中曲线可知，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，故J4更适合用于发酵．
故答案为：
（1）ABC
（2）划线法或稀释涂布法
（3）不可以               扩大培养的液体培养基由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长．
（4）酶活力或酶活性       回收再利用
（5）J4         发酵过程中会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

点评 本题考查了酶的固定化、对常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用的综合理解，把握知识点间的内在联系是解题的关键．