Question

【题目】新型冠状病毒（2019-nCoV）肺炎疫情，对我国民生健康和经济造成极大影响。新型冠状病毒相关的实验室检测技术，对新型冠状病毒的诊断与防控尤为重要。新型冠状病毒的检测最常见方法的是荧光定量RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应），RT-PCR的具体过程如图。回答下列向题：

（1）过程Ⅰ和Ⅱ都需要加入缓冲液、原料、酶和引物等，其中加入的酶分别是_______________，________________。

（2）RT-PCR过程通过对_____________的控制影响确的活性和DNA分子结构，从而使得整个反应过程有序地进行。

（3）过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要_______个引物B。

（4）新型冠状病毒的检测方法还可采用病毒抗原检测、病毒抗体检测，这些检测方法的原理是_____________。检测到新冠病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗原的理由是____________________________________，因此__________检测对传染性极高的新型冠状病毒（2019 - nCoV）疑似患者早期确诊意义不大。

Answer 1

【答案】逆（反）转录酶 热稳定性高的DNA聚合酶（Taq酶） 温度（或温度、pH） 2n-1 抗原和抗体发生特异性结合 病毒进入人体后，刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间 病毒抗体

【解析】

1、分析图示，过程I是由mRNA形成cDNA的过程，表示逆转录。过程Ⅱ先使mRNA-cDNA杂合双链解开，再以单链的DNA合成双链的DNA，最后利用RCR技术进行DNA复制。

2、PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变形原理，通过控制温度控制控制DNA分子的解聚和结合，DNA分子体内复制过程DNA的解旋是在解旋酶的作用下实现的；PCR扩增DNA片段过程最高经过n次扩增，形成的DNA分子数是2n个，其中只有2条单链不含有引物。

（1）过程I是由mRNA形成cDNA的过程，表示逆转录过程，需要加入逆转录酶，过程Ⅱ是PCR过程，需要加入热稳定性高的DNA聚合酶（Taq酶）。

（2）RT-PCR过程通过对温度的控制影响确的活性和DNA分子结构，从而使得整个反应过程有序地进行。

（3）过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，根据DNA分子半保留复制特点可知，该过程理论上至少需要2n-1个引物B。

（4）新型冠状病毒的检测方法还可采用病毒抗原-抗体检测，其原理是抗原和抗体发生特异性结合。病毒进入人体后，刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间，故检测到新冠病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗原，因此病毒抗体检测对传染性极高的新型冠状病毒疑似患者早期确诊意义不大。