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    5．尿素是一种重要的农业氮肥，不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用．因此，对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义．
    回答下列问题：
    （1）对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下：
    第一步：土壤取样．取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要灭菌（填“消毒”或“灭菌”）．
    第二步：样品稀释．通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度，原因是土壤中不同生物的数量不同．
    第三步：微生物的培养与观察．将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养．分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而不能利用尿素的微生物则不能生长繁殖．（注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作）
    （2）若对土壤悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数偏高．
    （3）对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定
    成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O酚红指示剂尿素蒸馏水
    培养基（含量）1.4g2.1g0.2g0.01g1.0g1000mL
    若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是葡萄糖、琼脂．若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色，pH升高的原因是尿素分解菌合成的酮酶将尿素分解成氨．
    （4）分解尿素的微生物在生态系统中的作用是将有机物分解为无机物（将尿素分解为氨）．

    分析 1、分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、选择样品涂布到培养基上、挑选单菌落．
    2、灭菌的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．灼烧灭菌适合于接种工具的灭菌，一般来说是在操作过程中金属类的接种工具．干热灭菌适合于玻璃器皿、金属工具的灭菌．高压蒸汽灭菌适合于玻璃器皿、接种工具以及培养基．特别注意培养基的灭菌只能用高压蒸汽灭菌．

    解答 解：（1）取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要灭菌．
    由于土壤中不同生物的数量不同，因此分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度．
    将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养．分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而不能利用尿素的微生物则不能生长繁殖．
    （2）若对土壤悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释．由于此种细菌属于需氧型细菌，主要分布在上层培养液汇总，因此用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数偏高．
    （3）对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定．培养基的成分应包括碳源、氮源、水和无机盐等．若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是葡萄糖（作为碳源）、琼脂（固体培养基中的凝固剂）．若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色，pH升高的原因是尿素分解菌合成的酮酶将尿素分解成氨．
    （4）分解尿素的微生物在生态系统中的作用是将有机物分解为无机物（将尿素分解为氨）．
    故答案为：
    （1）灭菌  土壤中不同生物的数量不同   不能利用尿素的微生物
    （2）偏高
    （3）葡萄糖   琼脂  尿素分解菌合成的酮酶将尿素分解成氨
    （4）将有机物分解为无机物（将尿素分解为氨）

    点评 本题主要考查微生物的培养与应用的相关问题，利用选择培养基筛选出分解纤维素菌，其中涉及培养基和接种环常采用的灭菌方法的区别，明确选择培养基、各种仪器材料的灭菌方法．

    练习册系列答案
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