[题目]苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(apmr为抗氨苄青霉素基因).①-④表示过程． (1)由HindⅢ酶切后.得到DNA片段的末端是( )A.B.C.D.(2)将图中①的DNA用HindⅢ.BamHⅠ完全酶切后.产生种DNA片段.②过程可获得种重组质粒．如果只用BamHⅠ酶切.目的基因与质粒连接� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（apmr为抗氨苄青霉素基因），①～④表示过程．

（1）由HindⅢ酶切后，得到DNA片段的末端是（）
A.
B.
C.
D.
（2）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，产生种DNA片段，②过程可获得种重组质粒．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得种重组质粒．
（3）该过程中Bt毒素蛋白基因插入质粒后，不应影响质粒的（）（多选，）
A.复制
B.转录
C.碱基对的数量
D.抗性基因的表达
（4）此基因工程中大肠杆菌质粒的作用是，根瘤农杆菌的作用是．生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的基因的基因频率的增长速率．

【答案】
（1）C
（2）4；2；2
（3）ABD
（4）作为运载体与Bt毒素蛋白基因重组；感染植物，将Bt毒素蛋白基因转入植物细胞内；抗Bt毒素蛋白
【解析】解：（1）由HindⅢ酶识别序列为切后，因此，得到DNA片段的末端是．（2）图①中，从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段．而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段，其中有1种与目的基因相同，所以反应管中有4种DNA片段．因HindⅢ、BamHⅠHind切割质粒可形成两种长度不同的片段，因此用DNA连接酶连接形成的重组质粒有2种；而BamHⅠ切割质粒只能形成一种长度的片段，但可能会出现正向和反向连接，所以用DNA连接酶能连接形成2种重组质粒．（3）质粒要能进行复制才能得到更多的表达产物，所以构建基因表达载体后，不能影响质粒的复制、表达和抗性基因的表达．（4）大肠杆菌质粒可作运载体，与与Bt毒素蛋白基因重组形成基因表达载体．根瘤农杆菌可以感染植物，将Bt毒素蛋白基因转入植物细胞内，即农杆菌转化法．转基因与非转基因作物混种，可降低抗性作物对害虫的选择性，使害虫种群中的抗性基因频率增长率减慢．
所以答案是：（1）C（2）4 2 2（3）ABD（4）作为运载体与Bt毒素蛋白基因重组感染植物，将Bt毒素蛋白基因转入植物细胞内抗Bt毒素蛋白
【考点精析】解答此题的关键在于理解基因工程的原理及技术的相关知识，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术．

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【实验一】从青蒿中提取青蒿素
【实验结果】相关实验数据如表1和表2所示．
表1

生长期	采集时间	青蒿素含量（mg/g）
成苗期	05/13	1.611
成苗期	06/13	2.933
生长盛期	07/13	4.572
生长盛期	08/13	5.821
花期	09/13	3.821
果期	09/13	3.198

表2

组织/采收日期	青蒿素含量（mg/g）
组织/采收日期	7月13号	7月23号	8月13号
根部	0.699（晒干）	1.048（晒干）	1.487（晒干）
根部	0.340（烘干）	0.719（烘干）	0.993（烘干）
茎部	未测得	0.108（晒干）	0.096（晒干）
茎部	未测得	0.086（烘干）	0.022（烘干）
老叶（叶龄21天）	3.609（晒干）	4.018（晒干）	4.269（晒干）
老叶（叶龄21天）	2.256（烘干）	2.705（烘干）	3.951（烘干）
新叶（叶龄7天）	4.572（晒干）	4.654（晒干）	5.821（晒干）
新叶（叶龄7天）	3.486（烘干）	3.692（烘干）	4.585（烘干）

【实验二】生物工程合成青蒿素
为避免青蒿被过度采集，研究者采用生物工程的方法生产青蒿素．但直接从愈伤组织和细胞培养提取青蒿素的效果很不理想，因而采取如图30中①～④所示实验流程合成青蒿素．其中发根农杆菌具有Ri质粒，可促进青蒿愈伤组织生根．

【实验三】植物激素对青蒿素含量的影响
萘乙酸（NAA）是最常用来调控发根生长及代谢中间产物形成的一种激素．研究者假设NAA能促进青蒿的愈伤组织发根，并能提高青蒿发根后产生青蒿素的含量．实验结果见表．
表6：NAA对青蒿组织发根和产生青蒿素的影响

组别	NAA浓度（mg/L）	发根生长比	青蒿素含量（mg/g）
A	0.025	34.457	0.080
B	0.050	33.500	0.166
C	0.100	29.400	0.128
D	0.250	15.813	0.000
E	0.500	13.059	0.000
F	0.750	8.706	0.000
G	①	27.101	1.480

（注：发根生长比指的是：收获时鲜重/接种量）
（1）提取青蒿素应选取的最佳青蒿材料是．据表1和表2分析，实验一的实验目的不包括
A．不同生长期青蒿中的青蒿素含量 B．不同青蒿组织中的青蒿素含量
C．不同干燥方式对青蒿素提取的影响 D．不同日照时长对青蒿素含量的影响
（2）实验二图中青蒿组织培养通常用的培养基名称是培养基．步骤③青蒿叶片组织加入抗生素的作用是．
（3）据实验二分析，下列相关叙述正确的是（）（多选）
A.未分化的青蒿组织中青蒿素含量高
B.该实验是从青蒿根中提取青蒿素
C.Ri质粒转化青蒿属于微生物基因工程
D.利用此生物工程方法可大量生产青蒿素
（4）实验三培养时影响青蒿素含量的可能因素有（写出2种即可）．表6中①表示的数值是．
（5）根据实验三结果，请画出发根生长比与NAA浓度的关系曲线图．

（6）由实验三可得出的结论是：
① ．
② ．