【题目】人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。（注：下图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒，新霉素为抗生素。）
回答下列问题：
（1）己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA，而丝氨酸的密码子为UCU，因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为____。
（2）若t-PA改良基因的粘性末端如图所示，那么需选用限制酶____和____切开质粒pCLY11，才能与t-PA改良基因高效连接，在连接时需要用到 ___酶。
（3）应选择____（能／不能）在加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞，目的是____。在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株，需选择呈____色的菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
（4）以上制造性能优异的改良t-PA蛋白的过程称为____工程。
【答案】AGA XmɑⅠ BglⅡ DNA连接酶 不能 以便筛选出导入质粒pCLY1I的大肠杆菌 白 蛋白质
【解析】
基因工程的基本操作步骤：获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→得到转基因生物→目的基因检测与鉴定。蛋白质工程可以通过基因修饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
（1）根据碱基互补配对的原则，丝氨酸的密码子为UCU，则其编码序列为TCT，所以模板链的碱基序列为AGA。
（2）若要质粒pCLY11与t-PA突变基因高效连接，需质粒和突变基因切割后产生黏性末端能碱基互补配对，t-PA突变基因切割后的黏性末端分别为：-GGCC和-CTAG，故质粒pCLY11需要用XmaI和Bg/II切割，连接时需要应DNA连接酶。
（3）由于质粒上以新霉素抗性基因作为标记基因，所以选择不能再加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞，以便筛选出导入质粒pCLY1I的大肠杆菌。重组质粒的mlacZ序列被破坏，表达产物使细胞呈白色，故在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞需选择呈白色的菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
（4）通过对基因的改造实现对蛋白质的改造，称为蛋白质工程。
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【题目】为研究淹水时KNO3对甜樱桃根呼吸的影响，设四组盆栽甜樱桃，其中一组倒入清水，其余三组分别倒入等量的不同浓度的KNO3溶液，保持液面高出盆土表面，每天定时测定甜樱桃根的有氧呼吸速率，结果如图。下列相关分析错误的是（ ）
A.检测甜樱桃根有氧呼吸速率可用O2或CO2作指标
B.细胞中ATP/ADP的比值下降可促进细胞呼吸
C.淹水时KNO3对甜樱桃根的有氧呼吸速率降低有减缓作用
D.A、B、C三点中，A点时甜樱桃根在单位时间内与氧结合的[H]最多
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【题目】植物虽然没有神经系统，但植物体也能对自身的生命活动进行调节。在植物的生长发育过程中，几乎所有生命活动都受到植物激素的调节，发现最早的是生长素。发现生长素的过程，是从达尔文注意到植物向光性并对此进行研究开始的。请据达尔文实验回答相关问题：
（1）上图是达尔文利用金丝雀虉草的胚芽鞘进行的实验及结果，依此提出的假说是胚芽鞘尖端受单侧光照射产生____________并向下面的____________传递。造成____________而使胚芽鞘出现向光性弯曲。
（2）胚芽鞘的作用有_________________________。
（3）请利用燕麦胚芽鞘、一定浓度的生长素和琼脂块等相关材料用具，设计实验，证明生长素能促进生长（写出实验设计思路和预期结果）________________________________________________
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【题目】如图是某森林在被大火完全烧毁前后（b点为发生火灾的时间 ），草本、灌木和乔木植物体内贮存的能量（P n ）变化示意图。下列有 关表述，错误的是（ ）
A.在整个演替过程中，各种群的数量一 般呈“S”型增长
B.a--b段，三类植物在群落中的斑块镶嵌分布，形成了群落的水平结构
C.由于b点时该森林被大火完全烧毁，故图示演替属于初生演替
D.可以用样方法调查某种乔木的种群密度
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【题目】某植株的一条染色体发生缺失突变，获得该缺失染色体的花粉不育，缺失染色体上具有红色显性基因B，正常染色体上具有白色隐性基因b（如图）。如以该植株为父本，测交后代中约有11%植株表现为红色性状。下列解释最合理的是（ ）
A.减数第二次分裂时姐妹染色单体3与4彼此分离
B.减数第一次分裂时非姐妹染色单体之间交叉互换
C.减数分裂时染色单体1或2上的基因b突变为B
D.减数第二次分裂时非姐妹染色单体之间自由组合
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【题目】在自然界中，生物与环境构成了统一的整体，生物和生物之间又形成了错综复杂的营养结构。运用生态技术进行养殖可得到品质高、备受欢迎的绿色产品。根据下图的相关内容，回答问题：
(1)图1为北极冻原生态系统中部分生物构成的食物网，在该食物网中共有________条食物链，其中雪兔和狼的种间关系是________。假如北极狐的食物1/2来自雷鸟，1/10来自植物，且能量从生产者到消费者的传递效率为10%，从消费者到消费者的能量传递效率为20%。若北极狐种群能量增加120 kJ，在不考虑其他因素影响的情况下，需要植物具备的能量是________kJ。
(2)图2为江苏某地进行生态养殖的创新模式，该模式将肉鸽养殖、鱼塘养殖、果林种植等产业进行有机结合。
①鸽种群一般遵循“一夫一妻制”，这就需要保持鸽种群适宜的________，以维持鸽种群正常的出生率。
②肉鸽摄入的饲料，其能量一部分通过呼吸作用以热能形式散失，一部分用于________，其他能量进入粪便。粪便可以进入鱼塘或者回田利用，遵循了生态工程的________原理。
③桉树能分泌“杀菌素”和芳香化合物，在鸽舍周边种植桉树林隔离带的目的是______________________。冲洗鸽舍的少量废水流入鱼塘后被净化，说明了鱼塘生态系统具有________能力。
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【题目】如图所示为“J”型曲线和“S”型曲线增长的模型。不考虑迁人率和迁出率，下列相关叙述错误的是（ ）
A.曲线X代表“J”型曲线，曲线Y代表“S”型曲线
B.图中b点和c点，种群的增长率相同且大于1
C.图中d点，种群的个体数为K/2，此时种群增长速率最大
D.图中e点，种群的出生率与死亡率基本相等
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【题目】在甲、乙、丙三支试管中分别加入一定量的淀粉溶液和等量的淀粉酶溶液，在均低于最适温度条件下进行反应，产物量随时间的变化曲线如下图所示。
（1）乙、丙试管温度的大小关系为乙________丙。如果适当提高甲试管的温度，则A点________（填“上移”或“下移”或“不移动”）。
（2）若在丁试管中加入与乙试管等量的淀粉和盐酸，在温度相同的条件下反应，测得乙试管反应速率远大于丁试管，该结果说明酶具有_________，具有该特性的原因是_______________________________。
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【题目】乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术（原理如图1），可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
（1）图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的 ____________（器官）中表达。
（2）从番茄成熟果实中提取 ___________为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因并扩增。
（3）合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点，用限制酶____________对上述两个基因进行酶切，再串联成融合基因，相应的Ti质粒应用限制酶 _______________进行切割，确保融合基因能够插入载体中。
（4）为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因 _______（正向/反向）插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后，接种在含有___的培养基中，可筛选出含有反义融合基因的农杆菌，再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
（5）在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，____________（填“能”/“不能”）用放射性物质标记的ACC氧化（合成）酶基因片段做探针进行检测，理由是____________。
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