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【题目】细胞周期按时间顺序可分为四个时期:G1、S、G2和M期,如图甲所示,各时期所发生的主要生理变化及部分调控因子如下表。请回答下列问题:

时期

主要生理变化

部分调控因子

G1

为遗传物质DNA的合成作准备

CDK4

CDK2(G1/S 转换)

S

DNA合成

CDK2

G2

主要完成蛋白质的合成,为进入分裂期作准备

CDK1(G2/M 转换)

M

核膜消失,染色体等发生变化

CDK1

G0

静息状态,细胞不生长,也不分化

(1)DNA聚合酶作用于细胞周期的___________期(填字母),纺锤体形成于___________期(填字母)调控因子___________的表达量增多,促进细胞周期从G1期向S期过渡。

(2)G1期如果缺少某些必需的营养成分(如必需氨基酸),细胞会终止其G1期的进程,进入________期(填字母),一旦补充了所缺少的成分后,细胞将回到G1期,这种调节的意义是可以避免___________

(3)若图甲中的1、2、3、4为一个细胞周期中的部分检查点,在DNA发生损伤时有阻滞细胞周期的作用。当DNA损伤出现在___________期(填字母)时,CDK1形成的复合物滞留在细胞质中,不能进入细胞核内发挥作用,阻止细胞进入下一时期,可以推测检查点最可能是图甲中的___________(填数字)。

(4)胸苷(TdR)双阻断法可使细胞周期同步化,若G1、S、G2、M期依次为10h、7h、3h、1h,经常一次阻断,S期细胞立刻被抑制,其余细胞最终停留在G1/S交界处;洗去TdR可恢复正常的细胞周期,若要是所有细胞均停留在G1/S交界处,第二次阻断应该在第一次洗去TdR之后___________h到___________h进行。

【答案】 S M CDK2 G0 物质和能量的浪费 G2 3 7 14

【解析】试题分析:细胞分裂分为:DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。分裂期(M期);G1期、S期和G2期共同组成间期。细胞要连续经过G1→S→G2→M。在一个细胞周期内,间期和有丝分裂期所占的时间相差较大,间期大约占细胞周期的90%~95%,分裂期大约占细胞周期的5%~10%。细胞经过一个细胞周期需要的时间要视细胞的类型而定。

(1)DNA聚合酶催化DNA复制的 过程,因此其作用于分裂间期中的S期;纺锤体形成于有丝分裂前期,即M期;根据表格分析可知细胞周期从G1期向S期过渡时,调控因子CDK2增多。

(2)G1期如果缺少某些必需的营养成分(如必需氨基酸),细胞会终止其G1期的进程,则将不能进入S期,而是变成静息状态,细胞不生长,也不分化的G0期细胞;一旦补充了所缺少的成分后,细胞将回到G1期,这种调节可以避免物质和能量的浪费。

(3)根据表格分析可知,CDK1出现于G2期,主要是促进G2期向M期转换,若DNA损伤导致CDK1形成的复合物滞留在细胞质中,不能进入细胞核内发挥作用,阻止细胞进入下一时期,说明DNA损伤发生在发生在期,应该在3处进行检测。

(4)根据题意分析,经常一次阻断,S期细胞立刻被抑制,则细胞至少停留在G1/S交界处,至多停留在S/G2交界处,前者通过7h达到后者,后者通过3+1+10=14h到达下一个周期的前者,因此若要是所有细胞均停留在G1/S交界处,第二次阻断应该在第一次洗去TdR之后7h到14h进行。

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(3)步骤4中应选用限制酶___________切割重组质粒以获得一段线性DNA,然后将其导入毕赤酵母菌细胞。为了确认毕赤酵母菌转化是否成功,应在培养基中加入___________以便筛选。除此以外,还可以用分子杂交技术鉴定上图中的毕赤酵母菌转化是否成功,过程如下图所示:

根据图中显示结果推算,若要获得16个成功导入该基因的酵母菌菌落,则上图中的酵母菌菌落数至少要为___________个。

(4)已知质粒在细胞传代过程中有丢失现象,试分析毕赤酵母表达系统的遗传稳定性高于大肠杆菌表达系统的主要原因_________________________________

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