Question

4．请回答下列生物技术方面的问题．
（1）菊花的组织培养的操作程序中，移栽前要将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间进行壮苗，壮苗的目的是使试管苗适应自然环境、提高抵抗力和生活力．
（2）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的微生物是附着在葡萄皮上的酵母菌（野生型酵母菌）．
（3）如图为提取胡萝卜素萃取样品的鉴定结果示意图，图中②代表的物质是其它色素杂质．上述鉴定所用的方法在“绿叶中色素的提取和分离”实验中用于叶绿体中色素的分离．
（4）为了调查南充市西河的水质状况，某兴趣小组决定测定该河流水样中的细菌含量，并对细菌进行分离．①该小组采用涂布法检测水样中的细菌含量．将1mL水样稀释100倍，在3个培养基上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个培养基上的菌落数分别为3938和37．据此可得出每升水样中的活菌数约为3.8×10⁷个．同时取若干灭菌后的空白培养基一起培养，这样做的目的是检测培养基灭菌是否合格（排除培养基灭菌不彻底或培养过程中杂菌污染）；②该小组采用划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落（使细菌数目随着划线次数增多而减少）．③该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．其原因是：振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．

Answer 1

分析 1、据图分析，A和D通过纸层析的结果只有一个点，属于标准样品的样点，比较纯．B和C结果都有两个点，含有其它色素杂质，为提取的胡萝卜素的萃取样品．
2、果酒的制作是利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精，酵母菌适宜的温度为18⁰C～25⁰C，采用的菌种为葡萄皮上面的野生型酵母菌，因此要选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗．不可反复冲洗，以免将葡萄上的酵母菌冲洗掉．
3、提取胡萝卜素的实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素，胡萝卜素是化学性质稳定、橘黄色结晶，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，根据胡萝卜素化学性质稳定、易溶于有机溶剂的特点，选用萃取法，胡萝卜素不具有挥发性，不能选用蒸馏法．萃取效率由萃取剂的性质和使用量，材料颗粒大小，紧密程度，含水量，萃取的温度和时间等条件决定，干燥的目的是尽可能除去水分，提高萃取效率．胡萝卜素溶于层析液中，并随层析液在滤纸条上扩散，故可用纸层析法进行鉴定，并以标准胡萝卜素样品作为对照．
4、计算样品菌液中的菌株数时，每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表样品菌液的稀释倍数．

解答 解：（1）菊花的组织培养移栽前应将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，目的是使幼苗适应环境、使幼苗长壮．
（2）选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗．不可反复冲洗，以免将葡萄上的酵母菌冲洗掉，影响酵母菌的发酵，所以起主要作用的微生物是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，酵母菌的发酵的条件是无氧条件下．
（3）A和D没有其它色素带，属于标准样品的样点．②就是其它色素带，该层析的目的是鉴定胡萝卜素，但叶绿素提取和分离实验中是对叶绿体中的色素进行分离．
（4）①由题意知，平板上生长的平均菌落数=（39+38+37）÷3=38个，则1ml水样中的菌落数=（C÷V）×M=（38÷0.1）×100=3.8×10⁴个，每升水样中的活菌数为3.8×10⁴×10³=3.8×10⁷个．微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格． 
②该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时的接种环要通过灼烧灭菌；平板划线法分离菌株时，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．（使细菌数目随着划线次数增多而减少）．
③由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需要菌，由于振荡培养提高l培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快．
故答案为：
（1）使试管苗适应自然环境、提高抵抗力和生活力  
（2）酵母菌（野生型酵母菌）    
（3）其它色素杂质   叶绿体中色素的分离  
（4）①3.8×10⁷检测培养基灭菌是否合格（排除培养基灭菌不彻底或培养过程中杂菌污染）    
②灼烧   将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落（使细菌数目随着划线次数增多而减少）  
③溶解氧 （氧气）     营养物质

点评 本题的知识点是果酒的制作、菊花组织的培养、微生物鉴定、胡萝卜素的提取方法，主要考查学生对相关基础知识的掌握与综合运用能力．