[题目]研究表明.HER2/neu是一种原癌基因.它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达.抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长.目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂.(1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量 (填低或高).H蛋白是一种跨膜蛋白.结构如图所示.制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时.应构� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

引物对A

P1　GTCCGCTAGTGGCTGTG

P2　AGCTGGCGTTTAGCCTCG

引物对B

S1　AAGCCGGGCGCGCCCGGAA

S2　TTCGGCCCGCGTTATGCGCG

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

【答案】低胞外引物与模板DNA单链 B 分泌抗H蛋白抗体的B淋巴细胞(或浆细胞) 抗H蛋白单克隆抗体与抗癌药物

【解析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。

（1）由题意可知，H蛋白在多种癌细胞中过量表达，因此H蛋白在成年个体的正常组织中表达量低。H蛋白为跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，其中胞外区可被免疫系统识别，故制备免疫小鼠所需H蛋白时，应构建胞外区基因。

（2）常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时，引物和模板DNA单链碱基互补配对，以便DNA子链延伸。引物对B的S1、S2存在大量可以互补配对的碱基对，可能会发生自身碱基互补配对或者S1和S2部分发生碱基互补配对，而失去与模板链结合的机会，因此其设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，H蛋白为抗原，将H蛋白注射到小鼠体内，会发生特异性免疫反应，产生特异性的浆细胞，进而产生抗H蛋白的抗体。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，通过抗原、抗体结合，最终清除癌细胞，也可以将抗H蛋白单克隆抗体和抗癌药物结合制成“生物导弹”，双重作用杀死癌细胞。

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