下面是探究pH对淀粉酶活性影响的实验：

【实验原理】将浸在不同pH淀粉酶溶液中的圆滤纸片放在淀粉琼脂培养基上，圆纸片上的酶会催化它周围的淀粉分解，放置30 min后将碘液倒在培养基上，如果pH合适，圆纸块四周便会出现一圈不产生蓝黑色的范围（清晰区），表示该处的淀粉已被完全分解为麦芽糖。酶活性越高，被分解的淀粉便越多，而所观察到的清晰区就越大，越清晰。本实验用的淀粉酶从绿豆中提取。　

【实验步骤】

（一）将10颗绿豆浸在水中约2d后，置于研钵中除去种皮，加入2mL蒸馏水将绿豆研磨成匀浆，过滤后获得 ① 提取液；

（二）取1块点样瓷板，选取其中6个凹穴分别编号为C1～C6，按下表所列，向相应编号的凹穴中滴加相应溶液（见图1）；

编号	所加溶液	状况
C1	蒸馏水	②
C2	稀盐酸	无酶的酸性介质
C3	稀碳酸钠溶液	无酶的碱性介质
C4	淀粉酶提取液	酶处于中性介质
C5	酶提取液十稀盐酸	酶处于酸性介质
C6	③	酶处于碱性介质

　　　　

（三）用打孔器打出6块滤纸小圆片，分别编号为C1～C6，将滤纸浸在相应凹穴的溶液中，用镊子将浸润的小圆片放在淀粉琼脂培养基上，37℃放置30min（见图2）；

（四）将碘液倒入培养皿内，旋转约l min后，用自来水缓缓地冲去淀粉琼脂培养基上多余的碘液；

（五）观察培养基表面并度量和比较各清晰区的直径，记录各区的清晰度。　

【实验结果】C1观察不到清晰区；C2 C3观察　　 ④　　 ；含纯酶提取液C4和处于酸性介质的酶提取液C5观察到所产生的清晰区的直径小；含处于碱性介质的酶提取液的滤纸片C6观察到清晰区直径最大。

请完成实验设计，并回答相关问题：

（1）补全实验步骤：①________________ ；②________________　；③________________ 。　

（2）补全实验结果：④________________ 。

（3）本实验中设置的对照组是：________________ （填编号），目的是________________ 。

（4）分析实验结果，结论是________________ 。

（16分）（1）玉米和小麦在适宜条件下光照一段时间后，将叶横切片用碘液染色，在显微镜下观察这两种植物的维管束鞘细胞和叶肉细胞，结果发现玉米叶片的维管束鞘细胞被染色，小麦叶片的                             被染成          ，被染色的原因是             。由此可知，玉米属于        植物，小麦属于         植物。

（2）当用碘夜对某一植物照光后的叶片横切染色时，却发现被染色的叶片同时出现上述玉米和小麦叶片的染色结果。据这个试验现象可推知：从光合作用角度来说，该植物具有     植物的特点，其光合作用固定CO₂形成的最初化合物的有          种，即            。

 

在一个“淀粉—琼脂”培养基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此实验装置放在37 ℃恒温箱中，保温处理24 h后，将碘液滴在培养基的5个圆点上，其实验结果记录于下表：

淀粉圆点	实验处理方法	碘液处理后的颜色反应
①	新鲜唾液与盐酸混合	蓝黑色
②	经过煮沸的新鲜唾液	蓝黑色
③	接种面包霉	棕黄色
④	只有新鲜的唾液	？
⑤	只有一定浓度的蔗糖溶液	？

请指出④和⑤所发生的颜色反应，以及③接种的面包霉的分泌物分别是

A．棕黄色、棕黄色、淀粉酶     B．蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶

C．棕黄色、蓝黑色、淀粉酶     D．棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶

 

34.  【生物一生物技术与实践】（8分）

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取lg，置于经  过______法灭菌处理的______ (填“固体”或“液体”）培养基中，28T振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行______处理。之后，将菌液涂布接种于以______为唯一碳源的固体培养基上，300C条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈____________状态放置。

(3)   筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是______，则说明此种菌能够______。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用______法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。