（8分）我国科学家成功克隆了控制水稻理想株型的关键多效基因IPA1。研究发现，基因IPA1发生突变后，会使水稻穗粒数和千粒重（以克表示的一千粒种子的重量）增加，同时茎秆变得粗壮，增加了抗倒伏能力。实验显示，将突变后的IPA1基因导入常规水稻品种，可以使其产量增加10％以上。下图表示该水稻新品种的简易培育流程，据图回答：

（1）上图所示流程中步骤①是实验所用技术的核心步骤，构建重组质粒需要的工具酶为_      __。

（2）将重组质粒导入土壤农杆菌之前，常用_     __处理该细菌，以增加该细菌__     _的通透性。

（3）土壤农杆菌的质粒上应该具备_         __以便筛选。

（4）④过程应用的主要生物技术是__    _，原理是_     __，在该技术过程中，以适当配比的营养物质和生长调节剂诱导脱分化，形成_          __，才能得到水稻新品种植株。

（5）从变异类型上分析，该水稻的新性状的出现应该属于可遗传变异中的__           _。

基因工程相关。2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

  （1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来        ，理由是：                                          。

  （2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是              。

  （3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是               。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免           。

  （4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：          （用数字表示）。①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

（11分）2006年12月，我国科学家成功培育出国内首例“荧光猪”。“荧光猪”即为绿色荧光蛋白转基因克隆猪，具有很高的基础研究价值，它的培育过程操作如下：
①从一种水母中提取绿色荧光蛋白基因，经处理后导入到体外培养的猪胎儿成纤维细胞的基因组中。
②从成纤维细胞中取出细胞核，移植到成熟的去核的猪卵母细胞中，构建重组细胞。
③体外培养重组细胞成转基因胚胎（由4~6个细胞组成的胚）。
④把转基因胚胎移植入受体母猪的子宫中。
⑤母猪怀孕114天，产下绿色荧光蛋白转基因克隆猪。
请回答下列问题：
（1）请按培育过程完成下面的“荧光猪”培育技术流程图。

（2）步骤①、④涉及的生物工程技术分别称为              和             技术。
（3）目前科学家还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过            技术来实现的。
（4）步骤③里，由1个重组细胞培育成4~6个细胞的胚，主要通过           来实现的。重组细胞最终能发育成动物个体的内在原因是                            。
（5）如果希望大量培育“荧光猪”，可在第④阶段，先通过          技术获得多个胚胎后，再进行移植。
（6）首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪（母猪）与普通公猪交配怀孕后，成功产下了11头猪崽，但只有部分猪崽具有绿色荧光遗传特征。试用孟德尔遗传定律加以解释。

（11分）2006年12月，我国科学家成功培育出国内首例“荧光猪”。“荧光猪”即为绿色荧光蛋白转基因克隆猪，具有很高的基础研究价值，它的培育过程操作如下：

①从一种水母中提取绿色荧光蛋白基因，经处理后导入到体外培养的猪胎儿成纤维细胞的基因组中。

②从成纤维细胞中取出细胞核，移植到成熟的去核的猪卵母细胞中，构建重组细胞。

③体外培养重组细胞成转基因胚胎（由4~6个细胞组成的胚）。

④把转基因胚胎移植入受体母猪的子宫中。

⑤母猪怀孕114天，产下绿色荧光蛋白转基因克隆猪。

请回答下列问题：

（1）请按培育过程完成下面的“荧光猪”培育技术流程图。

（2）步骤①、④涉及的生物工程技术分别称为               和              技术。

（3）目前科学家还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过             技术来实现的。

（4）步骤③里，由1个重组细胞培育成4~6个细胞的胚，主要通过            来实现的。重组细胞最终能发育成动物个体的内在原因是                             。

（5）如果希望大量培育“荧光猪”，可在第④阶段，先通过           技术获得多个胚胎后，再进行移植。

（6）首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪（母猪）与普通公猪交配怀孕后，成功产下了11头猪崽，但只有部分猪崽具有绿色荧光遗传特征。试用孟德尔遗传定律加以解释。

（7分）烟草由于受烟草花叶病毒的侵染而减产，我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草。下图是转基因烟草培育过程示意图。

请同答：

（1）引物I、II是根据          的脱氧核苷酸序列合成。从理论上推测，该DNA分子通过PCR扩增三次，产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为         。

（2）过程①表示        。Ti质粒至少需含有一个至多个              位点，以供抗烟草花叶病毒基因插入其中构建基因表达载体。

（3）过程②表示          ，需在人工控制条件下，将烟草细胞通过          过程形成愈伤组织，最终形成完整植株。该技术所依据的原理是        。