Question

【题目】枯草杆菌广泛分布于士壤及腐败的有机物中，某工厂为生产耐高温的淀粉酶，开展了枯草杆菌菌株的筛选、酶的固定化分析研究，其流程如图所示：

（1）配制培养基：该培养基应以____________为唯一碳源。

（2）取土样加入盛有无菌水的三角瓶中，常压加热至水沸腾后维持20分钟，其目的是____________。取出三角瓶置于37℃条件下培养24小时，液面产生黄白色皮膜，用接种环挑取菌膜，用_______法接种到平板上，于37℃恒温箱中培养24小时，取出观察，若淀粉被水解，菌落周围会产生_______，选择优良的菌株进行扩大培养。

（3）在建立和优化淀粉酶固定化酶柱连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的_________（答出2点即可）、反应pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过_______来调节。

（4）工业生产中，对淀粉酶需求量很大，目前较好的解决办法是将淀粉酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，具体是以海藻酸钠为“网格”载体，戊二醛为交联剂，即采用______和交联法两种方法将酶固定化，以实现____________，从而减少对淀粉酶的需求。

Answer 1

【答案】淀粉 筛选出耐高温菌株 平板划线 透明圈 固定化酶的量、反应液温度 控制反应器液体流速 包埋 重复利用

【解析】

微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。固定化酶和固定化细胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化学结合法。

（1）由题“生产耐高温的淀粉酶”可知，该培养基应以淀粉为唯一碳源。

（2）因筛选的是耐高温的淀粉酶，土壤加入无菌水后加热至水沸腾维持20分钟以筛选出耐高温菌株。筛选菌株用平板划线法接种，恒温培养后观察，菌落周围产生透明圈，说明淀粉酶被水解。

（3）影响酶活性的因素有温度、pH和酶浓度等，在建立和优化淀粉酶固定化酶柱连续生产工艺研究中，主要优化各固定化酶反应器中的固定化酶的量、反应液温度、反应pH和酶反应时间等因素。酶反应时间可通过控制反应器液体流速调节。

（4）以海藻酸钠为“网格”载体为包埋法，可以实现酶的重复利用，从而减少对淀粉酶的需求。