【题目】质粒P含有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr），外源DNA的插入会导致插入部位基因的失活。重组人干扰素a-1b是我国第一个国内批准生产的基因工程药物。下图所示为利用质粒P和人干扰素基因构建基因表达载体P1的示意图。回答下列问题：
限制酶 | EcoR V | Sau3AI | BamH I |
识别序列及切割位点 |
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（1）据图分析，为便于过程①所获得的目的基因片段能够顺利与质粒P连接，需要在目的基因片段加上__________序列。成功导入P1的受体菌落具有的抗药性特点为__________。
（2）过程③用到的酶为__________。为了保证目的基因能够正常表达，在构建P1时需要将目的基因插入__________之间。
（3）科学家最早就是利用基因工程方法在大肠杆菌和酵母菌细胞内获得了干扰素，利用大肠杆菌作为受体菌的优点是____________________。以大肠杆菌为受体细胞时通常用人特定细胞的mRNA为材料来获得cDNA，其原理是______________________________。
（4）若要检测是否表达出干扰素，可用__________（物质）对工程菌中提取的蛋白质进行检测。
【答案】GATC 具有四环素抗药性，没有氨苄青霉素抗药性 BamHⅠ和DNA连接酶 启动子和终止子 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 在逆转录酶的作用下，以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA 干扰素抗体
【解析】
分析题图：图中①为获取目的基因的过程，②表示利用PCR技术扩增目的基因，③表示构建基因表达载体的过程。
（1）由图可知，目的基因两侧都是黏性未端，根据表中三种限制酶的识别序列和切割位点（EcoRV酶切形成的是平末端，Sau3AI和BamHI酶切形成的末端都是黏性末端，且碱基序列均为GATC）可知，因此还需在引物的一端加上GATC序列，以便于P1的构建和筛选。若用Sau3AI切割会同时破坏氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，若用限制酶ECoRV切割，产生的是平末端，且会破坏复制原点，因此不能用EcoRV和Sau3AI切割，应该用BamHI切割，其会破坏氨苄青霉素抗性基因，不会破坏四环素抗性基因，因此成功导入P1的受体菌落具有四环素抗药性，没有氨苄青霉素抗药性。
（2）据上分析可知，过程③表示构建基因表达载体的过程，需要用到限制酶和DNA连接酶，其中限制酶为BamHⅠ。为了保证目的基因能够正常表达，在构建P1时需要将目的基因插入启动子和终止子之间。
（3）大肠杆菌具有繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等特点，常利用大肠杆菌作为受体菌。在逆转录酶的作用下，以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA，故常用人特定细胞的mRNA为材料来获得cDNA。
（4）若要检测是否表达出干扰素，可用干扰素抗体对工程菌中提取的蛋白质进行检测。
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【题目】为研究DNA的复制方式，科学家进行了同位素示踪实验。大肠杆菌先在含15N的培养基中培养若干代，使DNA的所有氮元素均成为15N（离心结果见甲试管），后转至含14N的培养基培养。每20分钟繁殖一代，提取每代大肠杆菌的DNA进行离心，实验结果如图中乙、丙、丁三支试管所示。有关说法错误的是（ ）
A.大肠杆菌培养40分钟后才能出现丁试管的结果
B.乙试管是大肠杆菌在14N培养基中繁殖一代的结果
C.大肠杆菌在14N培养基繁殖三代后DNA全部含有14N
D.15N与含14N培养液互换，繁殖一代的结果与丙相同
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【题目】某同学为验证胰岛素能降低血糖浓度、胰高血糖素能升高血糖浓度，设计了以下实验步骤：
实验材料：健康、生长状况相似的小白鼠若干、适宜浓度的胰岛素溶液、适宜浓度的胰高血糖素溶液、生理盐水、注射器等
实验步骤：
① 将健康、生长状况相似的小白鼠均分为A、B、C三组，检测小白鼠的血糖浓度，并计算平均值。
② 给A 、B组中的每只小白鼠注射适量适宜浓度的胰岛素溶液，给C组的每只小白鼠注射 。半小时后检测小白鼠的血糖浓度，并计算平均值。
③ 给A 、C组中的每只小白鼠注射一定量的生理盐水， 。
请回答相关问题。
（1）请将实验步骤中的补充完整。②_____________________；③___________________。
（2）画出坐标曲线图并表示实验过程中三组小白鼠的血糖浓度变化过程。_____________（小白鼠生命活动对血糖的影响忽略不计。）
（3）①正常人尿液中检测不到葡萄糖，其原因是________________。
②胰岛素能降低血糖浓度的原因是___________。高等动物体内的胰高血糖素由_______细胞分泌。
（4）下图是胰岛素作用机理模式图
图中贮存葡萄糖转运蛋白的的囊泡是由___（填细胞器名称）产生的，据图分析，下列现象不会导致糖尿病的是_______。
A．胰岛素缺乏 B．胰岛素受体缺陷
C．葡萄糖转运蛋白无法合成 D．酶发生磷酸化
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【题目】人类白化病基因位于11号染色体上，ABO血型基因位于9号染色体上。下图甲为两个家系成员的白化病性状表现，表乙为血型表现型和基因型的对应关系。已知Ⅱ-3和Ⅱ-5均为AB血型，Ⅱ-4和Ⅱ-6均为O血型。下列有关说法正确的是（ ）
A.人类出现白化病的根本原因是缺乏酪氨酸酶无法合成黑色素
B.决定ABO血型的基因IA、IB、i互为等位基因，遵循分离定律
C.Ⅰ-5个体可能有6种基因型，Ⅲ-1为A型血的概率为1/2
D.Ⅲ-1与Ⅲ-2生育一个女孩，该女孩为白化病患者的概率为1/10
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【题目】间作可提高土地利用率，但作物之间又存在着激烈的竞争。研究小组研究甲、乙两种作物的间作效果，在一定的CO2和温度条件下（CO2为大气中的浓度，温度为20℃，该温度是当地白天的平均气温，光合作用和呼吸作用有关酶的最适温度都高于20℃），测得甲、乙两种植物光合速率与呼吸速率的比值（P/R）随光照强度变化的曲线图（甲、乙表示单作情况下，甲’、乙’表示间作情况下）。请回答下列问题：
（1）甲、乙两植物中更适合在树阴处生存的是__________，判断依据是__________。
（2）若在某一时刻将实验温度适当降低，则此时P/R值可能保持不变吗？__________，判断的理由是______________________________。
（3）已知当地昼夜时长大体相等，请分析甲、乙两植物是否适合间作？__________。
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【题目】某校生物兴趣小组将等量甲、乙两个品种的新鲜小麦叶片，分别置于两个体积、CO2浓度等完全相同的密闭小室中，利用灵敏的CO2红外线测量仪追踪相同条件下两个小室内CO2浓度的变化，获得如图曲线。下列叙述不正确的是（ ）
A.题中“相同条件”是主要指光照、温度等相同
B.t1~t2时间段，乙品种叶片的光合作用速率为0
C.从0到t2时间内，甲品种叶片内有机物含量增加
D.乙品种与甲品种相比，乙品种能在较低的CO2浓度下生长
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【题目】下图为二倍体植物百合（2n=24）减数分裂过程中的几幅细胞图像，叙述正确的是（ ）
A.百合进行减数分裂过程的顺序为①→⑤→③→④→②
B.同源染色体分离，染色体数目减半发生在图②所示细胞时期
C.非同源染色体自由组合发生在图③所示细胞时期
D.图⑤所示细胞时期，移向细胞两极的基因组成一般不同
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【题目】科研人员对猕猴(2n=42)的酒精代谢过程进行研究，发现乙醇进入机体内的代谢途径如下图所示。缺乏酶 1，喝酒脸色基本不变但易醉的猕猴，称为“白脸猕猴”； 缺乏酶 2，喝酒后乙醛积累刺激血管引起脸红的猕猴，称为“红脸猕猴”；两种酶都有的猕猴，称为“不醉猕猴”。请回答问题：
（1）乙醇进入猕猴机体内的代谢途径，说明基因可以通过控制_____的合成来控制代谢过程，从而控制生物的 。猕猴的乙醇代谢与性别关系不大， 判断依据是________________________。
（2）图中基因 b 由基因 B 突变而来，基因 B_______（可以/不可以）突变成其他多种形式的等位基因，这是因为基因突变具有________的特点。
（3）“红脸猕猴”的基因型有______种 ，“白脸猕猴”的基因型有_________________种。
（4）完善如下实验设计和预期，以确定某只“白脸猕猴”雄猴的基因型。
实验步骤：
①该“白脸猕猴”与多只纯合____________ 杂交，产生多只后代。
②观察、统计后代的表现型及比例。
结果预测：
Ⅰ若子代全为“红脸猕猴”，则该“白脸猕猴”的基因型为_________________；
Ⅱ若子代“红脸猕猴”：“不醉猕猴”=1：1，则该“白脸猕猴”的基因型为_________；
Ⅲ若子代___________________，则该“白脸猕猴”的基因型为___________。
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【题目】（一）图（a）中的三个 DNA 片段上依次表示出了 EcoRI、BamHI 和 Sau3AI 三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体的示意图（载体上的 EcoRI、Sau3AI 的切点是唯一的）
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）经 BamHI 酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被 _______________酶切后的产物连接。
（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组质粒，如图（c）所示。这三种重组质粒中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_______________。不能表达的原因是___________。
（3） DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，它作用对象是 ________键。
（二）丝素蛋白是家蚕的一种分泌性复合蛋白，由丝素蛋白重链（FibH）、丝素蛋白轻链（Fibl）和 P25 糖蛋白组成。将 Fibl 基因导入大肠杆菌（不含质粒 A）并实现表达的过程如图所示。
①构建重组质粒时要用到的工具酶是________________。
②接种在含氨苄青霉素培养基上的大肠杆菌，有的不能形成菌落，原因是____________。
③影印接种就是用丝绒做成与平板大小相近的印章，然后把长有菌落的母平板倒置在丝绒印章上，轻 轻印一下，再把此印章在新的培养基平板上轻轻印一下。经培养后，比较新平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置，推测可能导入了重组质粒的菌落是 ____________（用字母表示）。
④目的基因成功表达的标志是_______________。
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